Cellules endothéliales microvasculaires cardiaques porcines

Cellules primaires vs lignées cellulaires:

Cellules isolées directement à partir de tissus humains ou animaux par des méthodes enzymatiques ou mécaniques. Strictement parlant, les cellules isolées de l'organisme jusqu'à ce qu'elles soient passées sont appelées cellules primaires, et la grande majorité des cellules primaires peuvent être divisées 10 à 15 fois in vitro (ce qui est lié à la longueur des télomères de la cellule), ainsi que des facteurs tels que l'extraction, le coût, etc., désignent généralement les cellules cultivées de la première à la dixième génération comme cellules primaires.

‍Cellules endothéliales microvasculaires cardiaques porcines

Propriétés de la marchandise:

Introduction aux cellules:

Endothélium microvasculaire du cœur de porc isolé du tissu cardiaque; Le cœur est un organe important dans le corps des vertébrés, dont la fonction principale est de mettre la pression sur le flux sanguin pour le faire fonctionner dans toutes les parties du corps. Le cœur est constitué du muscle cardiaque, composé de quatre cavités: l'oreillette gauche, le ventricule gauche, l'oreillette droite et le ventricule droit. Entre les oreillettes droite et gauche et entre les ventricules droit et gauche sont séparés par des intervalles qui ne communiquent pas les uns avec les autres, et entre les oreillettes et les ventricules il y a des valves (valves auriculo - ventriculaires) qui font que le sang ne peut circuler que dans les ventricules par les oreillettes et non pas En arrière. Le rôle du cœur est de stimuler le flux sanguin, de fournir un flux sanguin suffisant aux organes, aux tissus pour fournir de l’oxygène et divers nutriments, et d’éliminer les produits finis du métabolisme (tels que le dioxyde de carbone, les sels inorganiques, l’urée et l’acide urique, entre autres), permettant aux cellules de maintenir un métabolisme et une fonction normaux. Les cellules endothéliales microvasculaires cardiaques sont des cellules épithéliales plates monocouches qui composent la surface de la cavité microvasculaire du cœur, les substances biologiquement actives qu'il produit et sécrète ont un rôle important dans le maintien du tonus vasculaire, la régulation de la pression artérielle, l'antithrombose, etc., ont une importance psychophysiologique importante dans la pathogenèse de la maladie vasculaire cardiaque. Ces dernières années, de nombreuses études ont montré que les altérations fonctionnelles et pathologiques des cellules endothéliales microvasculaires du muscle cardiaque affectent directement la fonction des cellules du muscle cardiaque, ainsi que de nombreuses toxines, des facteurs inflammatoires et des cibles importantes telles que les virus, qui servent de modèle cellulaire pour l'étude in vitro dans l'Ischémie myocardique.-La pathogenèse de reperfusion et l'étude des facteurs de croissance des cellules paracrines jouent un rôle important.

Introduction à la méthode:

Endothélium microvasculaire de coeur de porc isolé en laboratoireCD31Identification par immunofluorescence, pureté possible90%Ci - dessus et ne contient pasVIH-1Et,HBVEt,VHC, mycoplasmes, bactéries, levures et champignons, etc.

Détection de qualité:

Endothélium microvasculaire de coeur de porc isolé en laboratoire avec collagénase-Méthode de digestion mixte combinée à la centrifugation à gradient de densité, après préparation par criblage de cultures de cellules endothéliales spécialisées, la quantité totale de cellules est d'environ5×105 cellules/La bouteille.

Information sur la culture:

Le paquet est conditionné:PLL(0,1 mg/ml), gélatine (0,1%) et

Milieu: milieu de base contenantFBSEt,FEGEt,bFGFEt,IGFEt,VEGFEt,héparineEt,hydrocortisoneEt,pénicillineEt,StreptomycineAttendre

Fréquence de changement de liquide: chaque2 - 3Changement de liquide une fois par jour

Caractéristiques de croissance: Wall

Morphologie cellulaire: cellules endothéliales comme

Caractéristiques de la génération: transmissible2 - 3Génération

Sucs digestifs:0,25%

Conditions de culture: phase gazeuse: air,95%;CO2，5%

Les cellules primaires passent généralement à environ 10 générations, la plupart des cellules vieillissent et meurent, mais très peu de cellules survivent à la « crise» et continuent à passer, les cellules survivantes sont généralement capables de passer à 40 - 50 générations, appelées souches cellulaires. Une « crise » survient après 50 générations, lorsque le matériel génétique de certaines cellules est modifié et cancéreux, de sorte qu'il peut être transmis sans restriction, appelé lignée cellulaire.

On pense également que les lignées cellulaires se réfèrent aux populations cellulaires qui se reproduisent après que les cultures cellulaires primaires aient été passées avec succès. Se réfère également aux cellules en culture qui peuvent être transmises en continu pendant une longue période. Il en est résulté une lignée cellulaire finie ultérieure, une lignée cellulaire infinie, de sorte que la lignée cellulaire se réfère étroitement aux cellules qui peuvent être transmises en continu et, au sens large, aux cellules qui peuvent être transmises. Alors que les souches cellulaires sont obtenues à partir de cultures primaires ou de lignées cellulaires par une méthode de sélection ou de formation de clones, une seule cellule avec des propriétés ou des marqueurs spéciaux est appelée souche cellulaire.

Les lignées cellulaires présentent les avantages d'une culture facile, d'une grande variété, d'un prix bon marché et d'un passage illimité, ainsi que d'une identification erronée et d'une contamination croisée en culture et en congélation.

Produits vendus par la société:

Récepteur de la gonadotrophine de sourisELISA (GHR)Kits de réactifs96T / 48T

Kit ELISA facteur de coagulation IX (FIX) chez le ratRatsIX(FIX)ELISAKits de réactifs

HumanComplemefragme4a,C4aELISAKitToxines allergiques humaines/Fragments de complémentELISA 4(C4a)Kits de réactifs96T / 48TSous - assemblage importé

Facteur de croissance du fibroblast humain9,bFGF-9ELISAKit facteur de croissance des fibroblastes alcalins humainsELISA 9(bFGF-9)Spécifications du kit:96T / 48T

Kit de détection quantitative par méthode colorimétrique de l'amidon linéaire végétal20Une fois

Humaerminaldéoxynucléotidylansférase, TdTELISAKitDésoxynucléotide transférase terminale humaineELISA (TdT)Spécifications du kit:96T / 48T

豚鼠内皮素1(ET-1)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Immunoglobulines de cobayeE(IgE)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Immunoglobulines de cobayePoint de vue totalement civilisé Elisa. 96T / 48T

Facteur inhibiteur de métalloprotéase matricielle de cobaye1(TIMP-1)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Soluble chez le ratELISA CD80(sCD80)Kit, nom anglais:Kit ELISA sCD80

Kit ELISA desmin (Des) de sourisNodin de souris(Des)ELISAKits de réactifs

SouriAlanine aminoansférase, ALTELISAKitAminotransférase de sourisELISA (ALT)Kits de réactifs96T / 48TSous - assemblage importé

Cliakit pour hormone parathyroïdienne humaine, pthelisakitSpécifications de l'hormone parathyroïdienne humaine:48T / 96T

Méthode de marquage isotopique activité télomérase cellulaireAPKit d'analyse électrophorétique10Une fois

ELISAKitPI3KRats0Inositol acide3Spécifications kinase:48T / 96T

LY9Souris recombinantesLY9 / CD229 / SLAMF3Les protéines(Saétiquette) Protéines

AMH/MIS MuellerianInhibition des antigènes du facteur1mgAMH/MIS MuellerianInhibition des antigènes du facteur

ANGPTL4Personnes reconstituéesANGPTL4Les protéines(Fc)étiquette) Protéines

protéine FLRT1 humainPersonnes reconstituéesFLRT1Les protéines(Saétiquette) et

protéine HEPACAM2 ratRat reconstituéHépaCAM2Les protéines(Saétiquette) et

Cellules endothéliales microvasculaires cardiaques porcinesLectine de Galactose4(GAL4)Protéines recombinantesGalectine recombinante 4 (GAL4)

protéine FLRT1 humainPersonnes reconstituéesFLRT1Les protéines(Saétiquette) et

ACPPSouris recombinantesPhosphatase acide prostatique / ACPPLes protéines(Saétiquette) Protéines

IFNGR1 protéine CynomolgusSinge Cynomolgus reconstituéIFNGR / IFNGR1Les protéines(Saétiquette) et

AK4Personnes reconstituéesAK4 / Adénylate Kinase 4 / AK3L1Les protéinesprotéines

Étapes spécifiques pour la culture de cellules primaires:

1, préparation: Prenez toutes sortes de fournitures de culture stérilisées et placez - les sur le comptoir de purification, désinfection UV pendant 20 minutes. Lavez - vous les mains et essuyez les mains jusqu'aux coudes avec de l'alcool à 75% avant de commencer à travailler.

2, disposition: Allumez la lumière d'alcool, installez le chapeau de paille.

3, traitement des tissus: Placez le bloc de tissu dans un bécher, rincez avec le liquide de Hanks 2 - 3 fois, Enlevez la tache de sang; Si l'on soupçonne une contamination possible des tissus, on peut d'abord les placer dans un mélange contenant du cyan pendant 30 à 60 minutes.

Digestion: ou avec un bain d'eau à température constante, ou dans un incubateur à 37 ℃ pour la digestion, la digestion doit être agitée toutes les 20 minutes, par exemple avec un agitateur électromagnétique à température constante pour une meilleure digestion. Le temps de digestion dépend de la taille du bloc de tissu et de la dureté du tissu.

6, séparation: dans le processus de digestion voir la turbidité du suc digestif, vous pouvez aspirer un peu de suc digestif sous le miroir, comme le tissu a été dispersé dans des masses cellulaires ou des cellules individuelles, immédiatement mettre fin à la digestion, immédiatement à travers un tamis en acier inoxydable approprié, filtrer les morceaux de tissu qui n'ont pas été suffisamment digérés. Centrifuger le digestat à basse vitesse (500 - 1000 tr / min) pendant 5 minutes, aspirer le surnageant et ajouter la quantité appropriée de liquide de culture contenant du sérum.

7, comptage: comptez avec une plaque de comptage, comme la densité cellulaire de la suspension cellulaire est trop grande, après ajustement de la solution de culture supplémentaire, divisé en flacons de culture. Pour la plupart des cellules, le pH requis est compris entre 7,2 et 7,4 et le liquide de culture est légèrement rouge, comme la coloration jaunâtre, indiquant que le liquide devient acide et peut être ajusté en NaHCO3.

8, culture: placé dans un incubateur à 37 ℃, comme la culture avec un incubateur de CO2, la bouche de la bouteille doit être bouchée avec un bouchon de coton de gaze ou un bouchon à vis, le bouchon de gaze est sujette à la moisissure, chaque fois que vous changez de liquide, vous devez changer un nouveau bouchon.