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Shanghai yaji biotechnologie Co., Ltd
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Notice d'utilisation du kit ELISA pour la pestose humaine (STA)
Date :2024-10-30Lire :1

Ce kit est destiné à un usage de recherche uniquement.

Gamme de détection: 96T

1,6 pg / ml-70 pg / ml

But de l'utilisation:

Ce kit est destiné à la déterminationéchantillons de sérum humain, de plasma et de liquides apparentésMaladie des insectes (STA) etContenu- Oui.

Principes expérimentaux

Ce kit applique la méthode sandwich double anticorpsSpécimenscentrepersonneMaladie des insectes (STA) etNiveau. Avec purifiépersonneMaladie des insectes (STA) etLe paquet d'anticorps est microplaqué, fait un anticorps de phase solide, dans les micropores du paquet est ajouté successivementMaladie des insectes (STA),De nouveau avecHRPMarquéMaladie des insectes (STA) etLes anticorps se lient, formant des anticorps-Antigènes-Complexe d'anticorps marqueur enzymatique, après lavageplusSubstratTMBRendu des couleurs.TMBDansHRPCatalysée par l'enzyme, elle se transforme en bleu et, sous l'action de l'acide, en jaune final. Nuances de couleur et dans l'échantillonMaladie des insectes (STA) etCorrélation positive. Avec un marqueur enzymatique en450nmDétermination de l'Absorbance à la longueur d'onde (ODValeur),Par la courbe standardCalcul des échantillonscentrepersonneMaladie des insectes (STA) etConcentration.

Composition du kit

1

30Liquide de lavage doublement concentré

20 ml×1bouteille

7

Liquide de terminaison

6 ml×1bouteille

2

Réactifs d'étalonnage enzymatique

6 ml×1bouteille

8

normeLe (120 pg/ml) et

0,5 ml×1bouteille

3

EnzymesLe paquet standard estPlaque

12Le trou ×8Article

9

Produits standardDilution

1,5 ml×1bouteille

4

ÉchantillonsDilution

6 ml×1bouteille

10

Mode d'emploi

1part

5

Agent de rendu des couleursAliquide

6 ml×1bouteille

11

Film de scellement

2Zhang

6

Agent de rendu des couleursBliquide

6 ml×1 /bouteille

12

Sac scellé

1un

Exigences relatives aux spécimens

1. l'extraction est effectuée le plus tôt possible après la collecte des spécimens, l'extraction est effectuée conformément à la littérature pertinente et l'expérience doit être effectuée le plus tôt possible après l'extraction. Si le test ne peut pas être effectué immédiatement, il peutPlacer le spécimen dans-20℃ conserver, maisDevraitÉvitez le gel - dégel répété

2. Les échantillons contenant nan3 ne peuvent pas être détectés, en raison dedu NaN3Inhibition de la peroxydase de raifort (HRP), l'activité.

étapes de fonctionnement

  1. Dilution des étalons: Ce kit fournit un étalon primitif, que l'utilisateur peut diluer dans de petits tubes en suivant le schéma ci - dessous.

60 pg/ml

5No. Standard

150μlLe double standard rejoint150μlDilution standard

30pg/ml

4No. Standard

150μlDe5Adhésion standard150μlDilution standard

15 pg/ml

3No. Standard

150μlDe4Adhésion standard150μlDilution standard

7,5 pg/ml

2No. Standard

150μlDe3Adhésion standard150μlDilution standard

3,75 pg/ml

1No. Standard

150μlDe2Adhésion standard150μlDilution standard

  1. Échantillonnage: Placez des trous blancs séparément (les trous de contrôle blancs n'ajoutent pas l'échantillon et le réactif de référence enzymatique, les étapes restantes fonctionnent de la même manière), des trous standard,Trou d'échantillon à tester. dans les paquets d'étalons enzymatiques sont précisément dosés sur la plaque standard50μlAjouter d'abord la dilution de l'échantillon dans le trou de l'échantillon à tester40μl, puis ajouter l'échantillon à tester10μl(la dilution finale de l'échantillon est5Fois).Ajouter l'échantillon au fond du trou de la plaque d'étalonnage enzymatique, essayez de ne pas toucher la paroi du trou,DoucementSecousseMélanger- Oui.

  2. Incubation: post - scellage de la plaque avec film de scellement37℃ incubation 30minute- Oui.

  3. Dosage: sera30Le multiple (48TDe20Fois) Eau distillée pour solution de lavage concentrée30Le multiple (48TDe20Fois) réserve après dilution

  4. Lavage: Retirez soigneusement le film de scellement, jetez le liquide,Sécher, remplir chaque trou avec du liquide de lavage, laisser reposer30Abandonner après quelques secondes, répéter ainsi5Une fois, tire à sec.

  5. Addition d'enzymes: ajout d'un réactif étalon enzymatique par puits50μl, à l'exception des trous vides- Oui.

  6. Incubation: même opération3- Oui.

  7. Lavage: même opération5- Oui.

  8. Rendu des couleurs: ajouter d'abord un agent de rendu des couleurs par trouA50μl, ajouter le révélateur de couleurB50μl, mélanger doucement,37℃ éviter le rendu de la lumière pendant 10 minutes.

  9. Terminaison: plus terminaison par trouliquide50 μl, mettre fin à la réaction(le bleu tourne au jaune à ce moment - là)- Oui.

  10. Détermination: zéro en climatisation vide,450nmMesure séquentielle de la longueur d'onde de chaque trouAbsorption de lumièreDegrés (ODValeur)- Oui. Le dosage doit être effectué après addition du liquide de terminaison15Faites - le en minutes.

    Résumé des procédures opérationnelles:

    calcul

    En abscisse de la concentration des étalons,ODLa valeur est en ordonnée, une courbe standard est tracée sur le papier de coordonnées, selon l'échantillon deODLa valeur est déterminée par la courbe standard pour la concentration correspondante; Multiplier parMultiple de dilutionOu avec la concentration de la norme avecODLa valeur calcule l'équation de régression linéaire de la courbe standard, en prenant l'échantillon deODLa valeur remplace l'équation, calcule la concentration de l'échantillon, multiplie parMultiple de dilutionC'est - à - dire la concentration réelle de l'échantillon.

    Précautions

    1. Le kit retiré de l'environnement réfrigéré doit être équilibré à température ambiante15 à 30Après les minutes peuvent être utilisés, les paquets d'étiquettes d'enzyme sont ouverts par la plaque après si elle n'est pas utilisée, les lattes doivent être emballées dans un sac scellé pour la conservation.

    2.Liquide de lavage concentréPeut - êtreil y auraCristallisationDégagement, peut être chauffé dans un bain - Marie pour aider à la dissolution lorsqu'il est dilué, le lavage n'affecte pas le résultat.

    3. l'éprouvette doit être utilisée à chaque étape et sa précision doit être fréquemment corrigée pour éviter les erreurs d'essai. Le temps d'ajout est mieux contrôlé dans5En minutes, si le nombre de spécimens est élevé, l'utilisation d'un pistolet d'échappement est recommandée.

  11. S'il vous plaît faire la courbe standard en même temps que chaque détermination, il est préférable de faire une porosité. Si la teneur en matière à mesurer est trop élevée dans un spécimen (échantillonODValeur supérieure au premier trou du trou standardODValeur), veuillez d'abord diluer un certain multiple avec la dilution de l'échantillon (nFois) après la détermination, s'il vous plaît dernière lors du calculMultiplier parMultiple de dilution total (× n × 5).

  12. Le film de scellement est à usage unique pour éviter la contamination croisée.

    6. substrat Veuillez conserver à l'abri de la lumière.

    7. strictement selon le fonctionnement des instructions, la décision de résultat d'essai doit être la lecture d'étalon d'enzyme.

    8Tous les échantillons, les liquides de lavage et les déchets de toutes sortes doivent être éliminés en tant que matières infectieuses.

    9. Les composants des différents numéros de lot de ce réactif ne doivent pas être mélangés.

    Conditions de conservation et durée de validité

    1.Kit de préservation:;2 - 8- Oui.

    2. période de validité:6Mois