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Shanghai yaji biotechnologie Co., Ltd
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Sheep bluetongue virus antibody (BLU - Ab) ELISA Kit détails d'utilisation fonctionnement?
Date :2024-12-23Lire :1

Ce kit est destiné à un usage de recherche uniquement.

96T

But de l'utilisation:

Ce kit est destiné à la détermination des anticorps contre le virus de la langue bleue dans des échantillons de sérum, de plasma et de liquides apparentés de mouton (BLU Ab), l'expression.

Principes expérimentaux

Ce kit application doubleAntigènesDétermination par la méthode sandwichSpécimenscentreAnticorps contre le virus de la langue bleue du mouton (BLU Ab) Expression. avec purifiéAntigènesPaquet est microplaqué, fait en phase solideAntigènesDisponible avec des anticorps contre le virus de la langue bleue dans l'échantillon (BLU Ab), en combinaison avec un lavage pour éliminer les anticorps non liés et les autres composantsHRPL'antigène marqué se lie, formant l'antigène-Anticorps-Complexe d'antigènes marqueurs enzymatiques, après lavageplusSubstratTMBRendu des couleurs.TMBDansHRPCatalysée par l'enzyme, elle se transforme en bleu et, sous l'action de l'acide, en jaune final. Avec un marqueur enzymatique en450nmDétermination de l'Absorbance à la longueur d'onde (ODValeur), avecCUTOFFComparaison des valeurs et donc détermination des anticorps contre le virus de la langue bleue du mouton dans le spécimen (BLU Ab), présence ou non.

Composition du kit

1

30Liquide de lavage doublement concentré

20 ml×1bouteille

7

Liquide de terminaison

6 ml×1bouteille

2

Réactifs d'étalonnage enzymatique

6 ml×1bouteille

8

Contrôle positif

0,5 ml×1bouteille

3

EnzymesLe paquet standard estPlaque

12trou×8Article

9

Contrôle négatif

0,5 ml×1bouteille

4

ÉchantillonsDilution

6 ml×1bouteille

10

Mode d'emploi

1part

5

Agent de rendu des couleursAliquide

6 ml×1bouteille

11

Film de scellement

2Zhang

6

Agent de rendu des couleursBliquide

6 ml×1 /bouteille

12

Sac scellé

1un

Exigences relatives aux spécimens

1. l'extraction est effectuée le plus tôt possible après la collecte des spécimens, l'extraction est effectuée conformément à la littérature pertinente et l'expérience doit être effectuée le plus tôt possible après l'extraction. Si le test ne peut pas être effectué immédiatement, les spécimens peuvent être placés dans-20℃ conserver, mais devraitÉvitez le gel - dégel répété

2. Les échantillons contenant nan3 ne peuvent pas être détectés parce quedu NaN3Inhibition de la peroxydase de raifort (HRP), l'activité.

étapes de fonctionnement

Numérotation: numéroter les micropores correspondants de l'échantillon dans l'ordre, chaque plaque doit être témoin négatif2Trous, contrôles positifs2Trou, contrôle vide1Puits (puits de contrôle vierges sans échantillon et réactifs de référence enzymatique, les étapes restantes fonctionnent de la même manière)

Addition: ajouter le contrôle négatif, le contrôle positif dans le trou de contrôle femelle, positif respectivement50μl. puis dansTrou d'échantillon à testerAjouter d'abord la dilution de l'échantillon40μl, puis ajouter l'échantillon à tester10μl. Ajouter l'échantillon au fond du trou de la plaque de marquage enzymatique, essayez de ne pas toucher la paroi du trou,DoucementSecousseMélanger,

Incubation: post - scellage de la plaque avec film de scellement37℃ incubation 30minute- Oui.

Dosage: sera30Eau distillée pour lessive doublement concentrée30Réserve après Dilution Multiple

Lavage: Retirez soigneusement le film de scellement, jetez le liquide,Sécher, remplir chaque trou avec du liquide de lavage, laisser reposer30Abandonner après quelques secondes, répéter ainsi5Une fois, tire à sec.

Addition d'enzymes: ajout d'un réactif étalon enzymatique par puits50μl, à l'exception des trous vides- Oui.

Incubation: même opération3- Oui.

Lavage: même opération5- Oui.

Rendu des couleurs: ajouter d'abord un agent de rendu des couleurs par trouA50μl, ajouter le révélateur de couleurB50μl, mélanger doucement,37℃ éviter le rendu de la lumière pendant 10 minutes.

Terminaison: plus terminaison par trouliquide50 μl, mettre fin à la réaction(le bleu tourne au jaune à ce moment - là)- Oui.

Détermination: mise à zéro dans un trou vide,450nmMesure séquentielle de la longueur d'onde de chaque trouAbsorption de lumièreDegrés (ODValeur)- Oui. Le dosage doit être effectué après addition du liquide de terminaison15Faites - le en minutes.

Calcul et détermination des résultats:

Efficacité du test: moyenne des puits témoins positifs1,00;Moyenne témoin négative0.20

Valeur critique (Coupe) Calcul: valeur critique=Moyenne des pores témoins négatifs+0.15

Décision négative: échantillonODValeur<Valeur critique (Coupe), anticorps contre le virus de la langue bleue (BLU Ab) négatif

Décision positive: échantillonODValeurValeur critique (Coupe), anticorps contre le virus de la langue bleue (BLU Ab) positif- Oui.

Précautions

1. L'opération est effectuée strictement selon les instructions, les différents composants de numéro de lot de ce réactif ne doivent pas être mélangés.

2. Le kit retiré de l'environnement réfrigéré doit être équilibré à température ambiante15 à 30Après les minutes peuvent être utilisés, les paquets d'étiquettes d'enzyme sont ouverts par la plaque après si elle n'est pas utilisée, les lattes doivent être emballées dans un sac scellé pour la conservation.

3.Liquide de lavage concentréPeut - êtreil y auraCristallisationDégagement, peut être chauffé dans un bain - Marie pour aider à la dissolution lorsqu'il est dilué, le lavage n'affecte pas le résultat.

4.Le film de scellement est à usage unique pour éviter la contamination croisée.

5. substrat Veuillez conserver à l'abri de la lumière.

6. Le résultat de l'essai doit être déterminé par la lecture de l'étalon enzymatique, lorsque la détection à double longueur d'onde est utilisée, la longueur d'onde de référence est630 nm

7Tous les échantillons, les liquides de lavage et les déchets de toutes sortes doivent être éliminés en tant que matières infectieuses. Le liquide de terminaison est2ML'acide sulfurique, vous devez faire attention à la sécurité lors de l'utilisation.

Conditions de conservation et durée de validité

1.Kit de préservation:;2 - 8- Oui.

2.Période de validité:6Mois