Souris moc1 / moc2

Nom de la cellulePour: Souris moc1 / moc2Cancer épidermoïde de la bouche

Lignée cellulaire:C57BL/6 Cxcr3-/-

Origine des cellules:À l'étranger

Identification des cellules:La qualification Str est passée

Morphologie cellulaire:Lymphoblastoïde - mère polygonale ressemblant à une cellule, épitaxiée + croissance en suspension

Milieu de culture:Dmem (avec NaHCO3 1,5 g / l) (basmed - aw - 013) + FBS 10% + P / S1% 500ml.

Conditions de culture: air en phase gazeuse, 95%; CO2, 5%. Température: 37 degrés Celsius, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%

Fond cellulaire:Le carcinome épidermoïde buccal (CSO) est un sous - ensemble important de cancers de la tête et du cou, et le principal facteur de risque de développer un CSO est l'exposition aux carcinogènes, qui distingue ce sous - Groupe de cancers de la tête et du cou des cancers de la tête et du cou induits par le virus de l'oncome humain. Mais le pronostic de l’oscc est resté stable pendant des décennies, entraînant une augmentation de la morbidité et de la mortalité.

Utilisation cellulaire:Pour usage scientifique seulement

Précautions

1. L'activité des cellules moc1 est particulièrement élevée, la valeur ajoutée est très rapide, il n'est pas recommandé que la densité de passage soit trop grande, alors que le choix est dilué un peu de resurfaçage, la longueur égale à environ 80% du temps de passage, il est difficile de digérer, placer dans l'incubateur pour La digestion, la durée est d'environ 3 - 4 minutes après la sortie

2. L'adhérence cellulaire moc2 et l'analogie cellulaire conventionnelle ne sont pas particulièrement fortes. Le cycle de multiplication n'est pas aussi rapide que moc1. Traité avec des méthodes de digestion conventionnelles.

3.Le battement sur le côté de l'appareil de culture aide les cellules à se détacher, le processus de battement dure environ 2 minutes avant de perdre la plupart des cellules, si le pourcentage de chute n'est pas encore beaucoup, vous pouvez également remettre dans l'incubateur pour continuer la digestion après 1 - 2 minutes pour sortir à nouveau pour la chute de battement, etc. 80 - 90% des cellules tombent après la digestion est terminée, la centrifugation est remise en suspension et le flacon est re - étalé, la dispersion est uniforme.

Livraison à température normale

Après réceptionLa bouteille t25 stérilisée et placée dans l'incubateur reste 2 - 3 heures après l'observation de la densité et de l'état de la photo 2 - 3 rétroaction à la vente, la densité peut être transmise. Avant le rapport de passage de 1: 2, et ainsi de suite après le passage complet à nouveau, il est recommandé de conserver un flacon entier dans un tube de congélation de 1 ml, un autre flacon continue le passage, la congélation répétée 2 - 3 seulement après l'amplification pour faire l'expérience, au cas où une Situation soudaine causerait une souche cassée.

Livraison de glace sèche

Lyophilisateur conventionnel d'expédition de cellules2 seulement, réanimation 1, un autre stand - by, une récupération n'a pas réussi quand strictement selon les exigences du fabricant pour réanimer le deuxième, aucun cas de récupération réussie ne conserve instantanément des photos de récupération pour nous informer.

Cellules plaquées

1. Défricher la culture, utiliser sans ions calcium et magnésiumPBS lubrifie les cellules 1 - 2 fois.

2. Adhérer0,25% (P / v) flacon T75 de 2 - 3 ML, placé dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger le temps de digestion de manière appropriée),

Ensuite, observez la digestion des cellules au microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, retournez rapidement à la table d'opération, appuyez sur quelques bouteilles de culture après l'ajout3 - 4 ml de milieu contenant 10% de FBS pour arrêter la digestion.

３. Aspirer après un léger battement, dansCentrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, éliminer le surnageant et souffler après avoir ajouté 1 - 2 ml de solution de culture. La suspension cellulaire a été divisée dans de nouveaux flacons t25 / boîtes de pétri de 6 cm dans un rapport de 1: 2 et les passages suivants ont été effectués dans un rapport de 1: 2 à 1: 5 selon la réalité.

4. Stockage de cellules congelées: après réception des cellules, il est recommandé de congeler un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

５. Milieu de culture pour le transport(milieu de culture de perfusion) ne peut plus être utilisé pour la culture des cellules, s'il vous plaît remplacer le milieu de culture fraîchement formulé selon les conditions de culture cellulaire instructions pour la culture des cellules.

Cellules en suspension

Cellules cultivées à l'état de suspension, l'état de croissance des cellules peut être maintenu par l'ajout de milieu dans le flacon de culture, en général la densité cellulaire est maintenue à1 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶ / ML (différentes cellules ont des exigences de densité différentes) peut maintenir la croissance normale des cellules. Si nécessaire flacon divisé peut recueillir la suspension cellulaire dans le tube de centrifugation à 1000 RPM, centrifuger pendant 5 min, défausser le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture après remise en suspension, distribuer la suspension cellulaire dans un nouveau flacon t25 dans un rapport de 1: 2, ajouter 6 - 8 ml de nouveau milieu de culture configuré selon les exigences des instructions pour maintenir la viabilité de la croissance des cellules, le passage ultérieur selon la situation réelle dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 4.

Biosécurité

1. Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'un poste de sécurité biologique de niveau 2, avec une attention particulière à la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est recommandé de toujours utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.