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13564080845
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Bâtiment 24, route 1661 jiaro, district de Jiading, Shanghai
Shanghai jico biotechnologie Co., Ltd
2843593679@qq.com
13564080845
Bâtiment 24, route 1661 jiaro, district de Jiading, Shanghai
Ce kit est destiné à l'utilisation de la recherche seulement laboratoire de l'entreprise fournit un test gratuit, 7 résultats de lever de soleil de travail, fournit des données brutes!
| Nom du produit | spécification | Méthode de détection | Numéro de cargaison |
| Coenzyme Ⅰ NAD (h) contenu test cassette microméthode | 100 tubes / 48 échantillons | Méthode des traces | BK-S01321 |
Présentation des marchandises:
| Détermination de la signification La Coenzyme I NAD (h) est largement présente dans les animaux, les plantes, les micro - organismes et les cellules en culture, le NAD + est le principal récepteur de l'hydrogène pour la glycolyse (emp) et le cycle des acides tricarboxyliques (TCA), et le NADH résultant est transmis à l'oxygène par la chaîne électronique respiratoire (etc), qui forme de grandes quantités de Ros tout en synthétisant l'ATP, tandis que le NADH est régénéré en NAD +. La réaction d'oxydation dans la décomposition des trois substances métaboliques du sucre, des lipides et des protéines est en grande partie achevée par ce système. Les hauts et les bas de la teneur en NAD (h) et du rapport NADH / NAD + peuvent être utilisés pour évaluer la force et la faiblesse des cycles de glycolyse et de TCA. Des valeurs plus élevées de NAD (h) et de rapport NADH / NAD + indiquent que la respiration cellulaire consomme plus d'oxygène et qu'elle est peroxydée. De plus, un rapport NADH / NAD + élevé peut également inhiber la glycolyse et le cycle TCA. En outre, les produits de dégradation du NAD + ont des effets régulateurs importants sur la signalisation cellulaire, le métabolisme et l'expression des gènes, entre autres. Principe de détermination Extraction du NAD + et du NADH respectivement dans l'échantillon avec des extraits acides et basiques, le NADH par hydrogénèse par PMS, le bleu de thiazole oxydé réduit (MTT) étant le méthylène, les valeurs d'absorption lumineuse étant détectées à 570 nm; Alors que le NAD + peut être réduit en NADH par l'éthanol déshydrogénase, il est en outre détecté par la méthode de réduction MTT. Instruments et fournitures à apporter Spectrophotomètre visible / étalon enzymatique, centrifugeuse de table, pipette, microcylindre de quartz / plaque 96 puits, mortier, glace et eau distillée. |
Composition et formulation des réactifs:
Extrait: liquide 100 ml x 1 flacon, conservé à 4°C.
Réactif I: liquide 5 ml × 1 flacon, conservé à 4 ° C à l'abri de la lumière.
Réactif II: liquide 15 ml x 1 flacon, conservé à 4°C.
Réactif III: liquide 3 mL x 1 flacon, conservé à 4°C.
Réactif IV: liquide 3 mL x 1 flacon, conservé à 4°C.
Les résultats de l'expérience m'ont jugé habile:
1, le résultat de la détermination quantitative calcule le contenu de la substance à mesurer dans l'échantillon selon la courbe standard.
La valeur od du trou d'échantillon est supérieure à la valeur od du contrôle négatif + 2 ~ 3sd, en tant que seuil de résultat positif.
Positif avec une valeur P / N (odd Pore positif / odd Pore négatif) supérieure ou égale à 2,1, une valeur P / N inférieure à 2,1 mais supérieure à 1,5 est suspecte et une valeur P / N inférieure à 1,5 est négative.
Méthode de détermination de l'ordre du kit ELISA: après l'ajout du substrat par enzymolyse et la fin de la réaction, à l'œil nu, la couleur des pores positifs est significativement plus foncée que (la loi de la concurrence est plus claire que) le contrôle négatif, et la couleur du contrôle négatif est proche du témoin négatif, jugé négatif.
Partagez avec vous la classification et les exigences des réactifs instables courants:
① les réactifs volatils et à faible point de combustion doivent être scellés, placés à l'ombre, ventilés et conservés loin de la source d'incendie.
② avec de la vapeur d'eau, l'eau réagit avec des substances à sceller et à conserver loin de la source d'eau.
③ facile à agir avec l'oxygène réactif, doit être scellé pour préserver ses solides ou Cristaux, ne convient pas pour le stockage à long terme de sa solution aqueuse, l'acide sulfureux, solution d'acide sulfurique d'hydrogène pour le stockage scellé, le potassium, le sodium, le phosphore blanc plus de forme scellée liquide.
④ les substances qui réagissent avec le dioxyde de carbone doivent être conservées hermétiquement, leurs solutions correspondantes sont plus susceptibles de réagir que les solides, donc plus d'attention à la conservation hermétique.
⑤ réactifs volatils ou décomposés par eux - mêmes à sceller, mettre dans un endroit frais et ventilé pour conserver.
Étapes opérationnelles:
1. Préparation des échantillons:
Préparation des échantillons cellulaires: les cellules sont collectées et lavées 1 à 2 fois avec du PBS ou de la saumure physiologique prérefroidie à 4 ° C ou dans un bain de glace. Les précipités sont précipités avec un lysat de cellules tissulaires pré - refroidi à 4 ° C ou un homogénat de bain de glace (un homogénateur en verre ou divers homogénateurs électriques courants peuvent être utilisés). L'homogénat est ensuite centrifugé à 4°C et le surnageant est prélevé comme échantillon à tester.
B. préparation des échantillons de tissus: les animaux sont prélevés après élimination du sang par perfusion avec une solution saline physiologique (NaCl 0,9%, contenant 0,16 mg / ML). Selon la proportion de lysats de cellules tissulaires ajoutés 500 - 1000 µl pour 100 mg, 4 ° C ou homogénat de bain de glace (homogénateur en verre ou divers homogénateurs électriques courants peuvent être utilisés). L'homogénat est ensuite centrifugé à 4°C et le surnageant est prélevé comme échantillon à tester.
D. détermination de la concentration protéique à l'aide du kit de détermination de la concentration protéique BCA (p1511). La viabilité moyenne de la SOD dans un échantillon d'homogénat cellulaire ou tissulaire de 10 à 20 µg de protéine est d'environ 1 unité de viabilité (les différences entre les cellules et les tissus seront plus importantes, cette gamme de viabilité n'étant utilisée qu'à titre de référence préliminaire). Une quantité de 20 à 100 µg de protéines par préparation d'échantillon est généralement suffisante pour une détection ultérieure.
E. diluer l'échantillon de manière appropriée avec le tampon de détection SOD fourni avec le kit, en fonction de la concentration de protéines et de la quantité prévue d'utilisation de protéines. Par exemple, le foie de souris nécessite généralement une dilution de 10 à 100 fois. Les échantillons préparés peuvent être conservés au bain de glace s'ils sont déterminés le jour même; Si vous ne pouvez pas terminer la détermination ce jour - là, vous pouvez conserver la congélation à - 70 ℃, mais il est recommandé d'essayer de terminer la détermination le jour même.
2. Préparation du kit:
A. formulation du fluide enzymatique wst - 8: en se référant au tableau ci - dessous, en fonction du nombre d'échantillons à tester (y compris les normes), la quantité appropriée de fluide enzymatique wst - 8 est formulée, le fluide enzymatique wst - 8 est formulé à 4 ° C ou conservé dans un bain de glace, peut être utilisé le jour même, mais il est recommandé de l'utiliser autant que possible.
Remarque: en raison de la faible quantité de solution enzymatique et de sa facilité de décantation, il faut prendre soin de la centrifuger légèrement avant de l'utiliser, puis de la mélanger correctement avant de l'utiliser.
B. formulation du liquide de démarrage de la réaction: mélanger le liquide de démarrage de la réaction (40x) fourni avec le kit après dissolution, diluer dans la proportion de 1 μl de liquide de démarrage de la réaction (40x) ajouté à 39 μl de tampon de détection SOD, c'est - à - dire le liquide de démarrage de la réaction. 4 ℃ ou bain de glace pour la conservation, peut être utilisé le jour même, mais il est recommandé d'essayer d'utiliser maintenant.
C. (facultatif) Préparation des étalons SOD: pour les étalons SOD autonomes, diluer les étalons SOD avec les dilutions fournies avec ce kit à la série de concentrations suivante: 20 U / ML, 10 U / ML, 5 U / ML, 2,5 U / ML, 1,25 U / ML, 0625 U / ML. Dans les détections suivantes, on peut prélever 20 µl chacun, l'échantillon de référence étant détecté. Description: afin d'éviter une diminution de l'activité enzymatique de la SOD après dilution, les normes SOD doivent être utilisées dès maintenant; Ce kit ne nécessite pas de SOD comme étalon pour la détection de SOD, mais il est possible d'utiliser un étalon SOD comme témoin positif ou comme référence pour la quantification de l'activité SOD.
Aha3 aha3 anticorps (Arabidopsis thaliana)
Phospho - atp1a1 (ser23) phosphate de sodium - Potassium ATPase protéine A1 anticorps
Phospho - ASK1 (ser83) anticorps kinase 1 régulant le signal apoptotique des cellules phosphorylées
Aadacl1 Neutral ester hydrolase 1 anticorps
Astrocyte Human astrocytes anticorps
Aldolase A aldolase A anticorps
Annexin VI Membrane adhésine 6 anticorps
Beta - amyloid (25 - 35) beta - Amyloid Peptide (25 - 35) anticorps
Angiotensin I Angiotensin I anticorps
Adrenomedullin Adrenomedullin anticorps (Peptide n - terminal 20)
Arfaptin 2 ADP ribosylation Factor Binding Protein 2 anticorps
Avpr2 vasopressin receptor 2 anticorps
ASC apoptose Associated SPOT - like protein ASC anticorps
Afadin filamenteux Actin Binding Protein anticorps
Antithrombine III 抗3抗体
Serum Albumin (3f4) anticorps monoclonal sérum albumine humaine
CUB zona pellucida like domains Protein 1 (cuzd1) recombinant
Protéine recombinante recombinante de la famille des lectines de type C, membre a (clec111a)
Protéine recombinante recombinante C - type Lectin famille de domaines 2, membre C (clec2c)
La protéine recombinante recombinante dermokine (dmkn)
La protéine recombinante dickkopf related Protein 2 (dkk2)
Protéines recombinantes recombinantes de la protéine 5 (dlgap5) recombinante Discs, large homolog Associated Protein 5 (dlgap5)
Recombinant EGF like Domain Protein 6 (egfl6) Recombinant EGF like Domain protein, multiple 6 (egfl6)
Recombinant EGF like Domain Protein 7 (egfl7) Recombinant EGF like Domain protein, multiple 7 (egfl7)
Protéine recombinante recombinante ENAH / vasp like protein (evl)
FK506 Binding Protein - like protein (fkbpl) Recombinant FK506 Binding Protein like protein (fkbpl)
Coenzyme Ⅰ NAD (h) contenu test cassette microméthodeFms - like FLT3) Recombinant FMS like tyrosine kinase 3 (FLT3)
Protéine recombinante recombinante Gata Binding Protein 3 (gata3)
Protéine recombinante Gata Binding Protein 4 (GATA4)
Recombinant protéine recombinante G Protein Coupled receptor, famille C, groupe 5, membre a (gprc5a)
HtrA肽酶1 (HTRA1) 重组蛋白 HtrA Sérine Peptidase 1 (HTRA1) recombinante
Recombinant protéine recombinante htra serine peptidase 4 (htra4)