Vmrc - RCW (carcinome à cellules rénales)

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Vue d'ensemble

Propriétés de base de la cellule $R $N nom de la cellule vmrc - RCW (carcinome à cellules rénales) $R $N nom de la cellule vmrc - RCW $R $N numéro de marchandise XY - h1035 $R $N genre origine humaine $R $N Âge sexe masculin $R $N origine tissulaire rein $R $N caractéristiques de croissance croissance croissance de l'épithélium cellulaire $R $N morphologie cellulaire épithéliale cellulaire type de cellule $R $N spécifications de la cellule 1 215; Flacon de culture 10 ^ 6cells / t25 ou emballage de lyophilisateur 1ml $R $N milieu emem + 10% FBS + 1% anti -

Détails du produit

Vmrc - RCW (carcinome à cellules rénales)

I. propriétés fondamentales des cellules
Nom de la cellule	VMRC-RCW（Cancer des cellules rénales) et
Cell autre nom	VMRC-RCW
Numéro de marchandise	XY-H1035
Origine du genre	personne
Âge sexe	Homme - inconnu
Sources organisationnelles	Les reins
Caractéristiques de croissance	Croissance murale
Forme cellulaire	Cellules épithéliales comme
Introduction au contexte	-
Niveau de biosécurité	-
Spécifications des cellules	Flacon de culture 1 × 10 ^ 6cells / t25 ou emballage de lyophilisateur de 1 mL
Détection de mycoplasmes	Rien
Milieu de culture	EMEMLe +10%FBS+1%anti-anti
Conditions de culture	Phase gazeuse:95%air+ 5%CO2; Température:37℃
Conditions de congélation	Pas de gel de sérum, stockage d'azote liquide
Temps de multiplication	~ 24 - 30heure

II. Après réception cellulaireLe traitement de

1)Après avoir reçu les cellules, la paroi du flacon de désinfection à l'alcool à 75% place le flacon t25 à la température ambiante pendant environ 1h, s'il s'avère que le flacon de culture est cassé, qu'il y a un déversement de liquide et que les cellules sont contaminées, veuillez nous contacter rapidement après avoir pris Des photos.

2)S'il vous plaît confirmer l'état des cellules sous un microscope 4 ou 5X, tout en prenant des photos (10 ×, 20 ×) 2 - 3 de chaque cellule fraîchement reçue, ainsi qu'une photo de l'apparence du flacon de culture à retenir comme base de l'état des cellules au moment de la réception après - vente.

3)Cellules plaquées:Les cellules sont placées à la température ambiante pendant 1h et la croissance et l'application des cellules sont observées au microscope, certaines cellules de l'application se détachent en raison des vibrations et des conditions de formation de masse après la chute pendant l'expédition Express.Si la densité de croissance des cellules observées sous miroir est inférieure à 60%, le milieu de perfusion peut être retiré du flacon de culture (s'il y a des cellules non collées qui doivent être récupérées par centrifugation, remises en suspension dans le flacon de culture d'origine), ajouter 6 - 8 ml de milieu entier fraîchement formulé et mettre dans l'incubateur de cellules pour poursuivre la culture. Si la densité de croissance cellulaire est supérieure à 70% - 80%, les cellules peuvent être traitées par passage. Pendant le passage, si les cellules tombées en raison des vibrations de transport doivent être récupérées par centrifugation.

4)Méthode d'opération d'excrétion pendant le transport de cellules: la collecte de cellules excrétées est centrifugée, lavée une fois avec du PBS, centrifugée pour excréter, ajouter 1 mL d'enzyme dans le tube de centrifugation pour la digestion par soufflage pendant environ 20 secondes, plusLa centrifugation après la fin de la digestion dans le milieu entier de la pilule a été re - pavée et les cellules murales restantes ont été manipulées selon la méthode normale de passage des cellules murales.

5)Remarque: le milieu utilisé pour le transport (milieu de perfusion) ne peut plus être utilisé pour la culture des cellules, veuillez le remplacer par celui fraîchement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructionsMilieu entier de pillule pour cultiver les cellules. Le premier passage après réception des cellules est recommandé pour le passage du flacon de culture t25 1: 2.

Trois,finOpérations de culture cellulaire

1) Cellules de réanimation:Le traitement de lyophilisation de culture cellulaire suivant est fourni à titre de référence uniquement, les étapes opérationnelles spécifiques sont dominées par les instructions du produit livré.

Contiendra1 mlLyophilisateur de la suspension cellulaire dans 37℃ rapidement secoué dans le bain d'eau pour décongeler, plus4 mLLe milieu de culture est bien mélangé. Dans1000 tr/minCentrifugation sous conditions3 minutesRetirer le surnageant, plus1 à 2 mlBien souffler après le milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées à la culture pendant une nuit dans des flacons de culture contenant la quantité appropriée de milieu (ou la suspension cellulaire est ajoutée)3 cmDans la boîte, ajouter environ4 mLMilieu entier de pillule, incuber pendant la nuit). Changez de liquide le troisième jour et vérifiez la densité cellulaire.

2) Passage cellulaire:Si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

a)Défricher la culture, utiliser sans ions calcium et magnésiumPBSLavage des cellules1 - 2Une fois.

b)plus1 mlSucs digestifs (0,25 % trypsine-0,02 % EDTA), dans le flacon de culture, laissez le suc digestif infiltrer toutes les cellules, placez le flacon de culture dans37Digestion en incubateur ℃1 à 3 minutes(selon la digestion des cellules), puis observer la digestion des cellules au microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques bouteilles de culture après l'ajout2 à 3 mlLe milieu entier de la pilule termine la digestion.

c)Charger dans un tube de centrifugation stérile après avoir battu doucement,1000 tr/minCentrifugation5 minutesRetirer le surnageant, ajouter1 à 2 mlBien souffler après le liquide de culture.

d)Presser la suspension cellulaire1: 2Proportion à nouveau inclus8 mLDans une boîte neuve du milieu ou dans un flacon, placé dans un incubateur.

Passage de cellules adhérentes Remarque:

lDoitPBSLavez - le une fois.

lLes cellules observent plusieurs fois plus pour maîtriser le temps, ne terminez pas la digestion sans que les cellules tombent fondamentalement, puis soufflez vers le bas, de sorte que les cellules Il est plus facile de se différencier et de mourir.

lNe soufflez pas tout le temps sur les cellules

3) Stockage des cellules congelées:La lyophilisation cellulaire peut être effectuée lorsque la croissance cellulaire est en bon état. ci-dessousT25 bouteilles par exemple;

a)Recueillir les cellules et le liquide de culture cellulaire, charger dans un tube de centrifugation stérile,1000 tr/minCentrifugation sous conditions4 minutesRetirer le surnageant, utiliserPBSNettoyer, abandonner.PBSEffectuer un comptage cellulaire.

b)Ajouter le lyophilisat de cellules sans sérum en fonction du nombre de cellules, de sorte que la densité cellulaire 1× 10^ 6~ 1×10^ 7par mL, mélanger doucement, chaque lyophilisateur1 mlSuspension cellulaire, faites attention à ce que le lyophilisateur soit bien identifié.

c)Mettre le tube de congélation dans-80℃ réfrigérateur,24 heuresAprès transfert au stockage par irrigation à l'azote liquide. Enregistrez la position de la lyophilisation pour la récupérer la prochaine fois.

Quatre,Précautions de culture

1)Problèmes cellulaires, réapparition de la situation

a)Divers problèmes rencontrés lors du transport des cellules, perte de cellules, rupture du corps de la bouteille, fuite sévère de liquide de culture, etc., réédition;

b)Problème de contamination cellulaire, s'il vous plaît dans les 3 jours de la réception du produit, nous présenter des résultats expérimentaux réels, vérifier après la réédition;

c)Après 2 heures de repos des cellules expédiées à température normale, 2 jours après la réanimation des cellules expédiées congelées, la grande majorité des cellules n'ont pas survécu, (fournir des photos réelles et claires de l'état des cellules), réédition;

d)La glace sèche est conservée 2 jours après la réanimation des cellules expédiées ou les cellules expédiées à température normale sont restées pendant 2 heures et n'ont pas été ouvertes, la contamination est apparue, la réapparition;

e)Problèmes d'activité cellulaire, s'il vous plaît nous présenter des résultats expérimentaux réels dans les 7 jours suivant la réception du produit, l'identification de la viabilité cellulaire avec la coloration au bleu Trypan, et des photos quotidiennes des cellules, après vérification et réémission;

f)Le jour de la réception des cellules, ainsi que le jour 2,3 s'il vous plaît prendre des photos, 3 jours ne sont pas informés, le produit est considéré comme qualifié. Les problèmes survenant dans les 4 à 7 jours nécessitent de fournir des photos des 3 jours précédant la réception des cellules et des photos des problèmes survenus avec les cellules et les étapes détaillées des opérations liées aux cellules, et de communiquer avec le technicien, qui décide que nous sommes responsables de la réémission.

2) etProblèmes avec les cellules, ne pas les reproduire

a)La manipulation du client provoque une contamination cellulaire, pas de réémission;

b)Les erreurs de fonctionnement graves du client entraînent un mauvais état cellulaire et ne sont pas rééditées;

c)Non - nous recommandons le système de culture cellulaire pour provoquer un mauvais état cellulaire, pas de répétition;

d)L'état des cellules n'est pas bon, des photos réelles et claires de l'état des cellules des 3 premiers jours de culture n'ont pas été fournies et ne sont pas rééditées;

e)Lorsque la culture cellulaire a été causée par d'autres traitements qui ont causé des problèmes cellulaires, ne sont pas répétées;

f)Le délai de réception des cellules et de détection des problèmes de communication avec le personnel du service à la clientèle s'avère supérieur à 7 jours, sans réémission;

g)Selon les cas spécifiques

V. précautions

1. Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'un poste de sécurité biologique de niveau 2, avec une attention particulière à la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est recommandé de toujours utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.

3. La cellule est à usage scientifique seulement! Les instructions sont pour référence seulement sous réserve des instructions d'arrivée réelles!

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