Poly D - lysine (poids moléculaire: 15 - 300 000) milieu de culture

Poly-D-lysine (Mw 150 000-300 000)

Poly D - lysine (poids moléculaire: 15 - 300 000)

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Poly - L - lysine (Poly - L - lysine, PLL); Poly - D - lysine (Poly - D - lysine, PDL); Gélatine gelatine; Collagen type I collagène de type I; Fibronectine; Matrigel matrice colle; CAS：27964-99-4；

Informations sur le produit:

Introduction de base:

La polylysine, un polymère d'acides aminés chargé positivement capable de se lier à l'ADN, à la membrane des globules rouges ou à toute protéine chargée négativement, est un facteur d'adhésion cellulaire non spécifique qui favorise l'adsorption cellulaire sur une matrice en phase solide. Le mécanisme d'action réside dans le fait qu'il peut renforcer l'interaction électrostatique des ions chargés négativement à la surface de la membrane cellulaire et à la surface de la matrice en phase solide (par exemple, boîtes de culture cellulaire, lames de verre, etc.). Après adsorption sur la surface de culture, la polylysine augmente le nombre de sites de liaison cationique pour la liaison cellulaire. La taille du poids moléculaire de la polylysine est liée à la viscosité, c'est - à - dire que le poids moléculaire est faible et la viscosité est faible, plus il est facile à utiliser; Le poids moléculaire est plus élevé, la viscosité est plus élevée et il y a plus de sites d'adhésion fournis. La polylysine de poids moléculaire > 30 000 convient pour favoriser l'adhésion cellulaire à une matrice solide.

Il existe deux sous - types communs de polylysine (polylysine), les types d et L. Étant donné que la polylysine est un facteur d'adhésion non spécifique lié aux cellules, les deux sous - types peuvent être utilisés comme matrice solide encapsulée, ce qui favorise la croissance des cellules en culture cellulaire. La Poly - L - Lysine a été rapportée capable d'améliorer l'adhérence de la protéine sur des plaques de culture ELISA. Cependant, dans les applications cellulaires, certaines cellules sont capables d'hydrolyser la Poly - L - Lysine. Dans ce cas, la Poly - D - Lysine doit être utilisée comme facteur d'adhésion, protégeant ainsi les cellules contre la destruction par l'ingestion d'un excès de l - Lysine.

Ce produit est de la Poly - D - lysine (Poly - D - Lysine) de poids moléculaire de 150 000 à 300 000 et convient à la culture cellulaire. Comme substrat de culture cellulaire, les quantités recommandées sont: environ 0,5 ml - 1,0 ml d'une solution de polylysine à 0,1 mg / ML est nécessaire pour une plaque de culture de 25 cm 2. Ce produit peut également être utilisé comme comprimé collant lors de l'analyse histologique.

Conservation et méthodes de transport

Conservation: - 20°C conservation à sec, 3 ans de stabilité.

Transport: transport de sacs de glace.

Précautions

Dans certaines applications de culture cellulaire, certaines cellules digèrent la Poly - L - lysine et l'absorbent, et l'ingestion de trop de Poly - L - Lysine produit une certaine Cytotoxicité. Ainsi, dans ce cas, il est recommandé de choisir la Poly - D - Lysine telle que Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000)（#MX0922）。

2. Ce produit est fourni sous forme d'acide bromhydrique (HBR), si vous souhaitez éliminer l'acide bromhydrique dans ce produit, vous pouvez le dissoudre dans un tampon neutre et dialyser pour éliminer les ions sels.

3. Pour votre sécurité et votre santé, Veuillez porter des vêtements expérimentaux et utiliser des gants jetables.

Mode d'emploi

1. Préparation du liquide de stockage

Après dissolution adéquate de 10 mg de poudre dans 2 ml d'eau désionisée stérile, on obtient, après filtration sur membrane filtrante à faible Adsorption protéique de 0,2 µm, une solution de stockage de Poly - D - lysine à 5 mg / ML directement utilisable en culture cellulaire. Afin de maintenir la contamination causée par plusieurs utilisations, le liquide de stockage peut être placé dans un tube stérile en une seule portion d'utilisation, conservée à 4 ° C ou - 20 ° C pendant au moins 1 an.

2. Substrat enrobé pour la culture cellulaire

L'utilisation de Poly - D - Lysine pour des expériences de Packaging cellulaire nécessite l'optimisation des conditions de Packaging en fonction de différentes lignées cellulaires et applications. Les étapes générales sont les suivantes:
1) utilisez de l'eau stérile de qualité de culture de tissu ou du PBS pour diluer 5 mg / ml de solution de stockage de Poly - D - lysine à la concentration de paquet de son propre système expérimental. En règle générale, les boîtes de pétri / plaques habituelles sont utilisées à une concentration de 0,1 mg / ML, c'est - à - dire après dilution du liquide de stockage 50 fois.

2) plaque de culture cellulaire encapsulée dans des conditions stériles, la quantité utilisée est de 0,5 ml - 1,0 ml / 25 cm 2. Agitez doucement le fond de la plaque pour qu'il couvre toute la surface de la plaque.

3) après 5 min, retirer la solution de surface de la plaque de culture avec un pistolet et laver la plaque avec de l'eau de culture de tissu stérile ou du PBS; [Note]: certains cas prennent 1 ~ 2 heures pour terminer le pavage, d'autres ont besoin de passer la nuit à paver. Selon la situation.

4) après au moins 2h de séchage, la culture cellulaire peut être réalisée.

[Note]: si la verrerie ou les lames de verre après le paquet de polylysine doivent être stérilisées, elles peuvent être stérilisées par irradiation gamma (et non par autoclavage).

[Note]: si le paquet n'est pas nivelé par la surface, les lames en verre prétraitées avec de l'acétate de magnésium 1mm sont disponibles pendant 2 - 3H, après le nettoyage de cherdi avant de commencer le paquet. Alternativement, les lames de verre sont nettoyées à l'acide (acide chlorhydrique ou sulfurique) et ce traitement permet d'aplatir le paquet de solution de polylysine.

3. Études histologiques (paquets de lames)

Une solution de Poly - D - lysine à 0,1% (P / v) est généralement recommandée pour la préparation de lamelles histologiques. Après avoir traité les lames de verre avec une solution de polylysine de concentration correspondante pendant 5 min, les laver et les sécher à température ambiante pendant la nuit ou dans un four à environ 60 ° C pendant environ 1 h. [Note]: Cette solution de travail est conservée dans une bouteille en plastique à 4 ° C et limite Le nombre d'utilisations à moins de 4 fois.

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– Écrit / édité par V. shallan [Copyright mkbio懋kang]

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