Protéine recombinante de la pyruvate kinase humaine de type m2 (pkm2)

personneProtéine recombinante de la pyruvate kinase de type m2 (pkm2)

Nom du produit :Protéine recombinante de la pyruvate kinase de type m2 (pkm2)

Nom anglais:Isoenzymes recombinants de la pyruvate kinase M2 (PKM2)

M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; isoenzyme musculaire de la pyruvate kinase; Protéine liante à l'hormone thyroïdienne 1; protéine cytosolique liant l'hormone thyroïdienne; Pyruvate Kinase, Muscle

Modèle:CS-D233

Enzymes et kinases

Immunité tumorale

Espèces:Homo sapiens (humain, humain)

Source: expression procaryote

HôteE. coli

Niveau d'endotoxines:< 1,0 eu / μg (déterminé par Lal)

Localisation subcellulaire:: noyau, cytoplasme

Poids moléculaire prédit:13,4 kDa

Poids moléculaire réel:13 kDa (voir les instructions pour l'analyse différentielle)

Fragments et Tags:Lys141~Ala248 avec N-terminal Son étiquette

Composition du tampon:Tris 20 mm, tampon NaCl 150 mm (pH 8,0, contient 1 mm EDTA, 1 mm DTT, 0,01% skl, 5% trehalose et proclin300)

Caractéristiques: poudre lyophilisée

Pureté:> 97%

Point isoélectrique:5.4

Application:Contrôle positif ; immunogène; SDS-PAGE ; WB.

Spécifications:10μg50μg200μg1mg5mg

Méthodes / étapes pour les protéines:

I. où l'hydrocarbure est oxydé en dioxyde de carbone et l'eau s'échappe, l'azote dans les protéines est converti en ammoniac combiné avec l'acide sulfurique pour produire du sulfate de chlore dans l'acide sulfurique, puis l'addition de la distillation alcaline, de sorte que l'ammoniac s'échappe, est absorbé par l'acide borique, Puis titré dans une solution standard d'acide sulfurique ou chlorhydrique. Teneur en protéines selon la consommation d'acide multipliée par le facteur de conversion. L'auteur, basé sur des années d'expérience opérationnelle, estime que,
Au cours de l'inspection, il convient de prêter attention aux trois liens suivants. I. contrôle de l'échantillon, de la quantité de réactifs ajoutés.
II.1. la quantité d'échantillon à peser dépend du haut et du bas de la protéine dans l'échantillon. La teneur en azote dans les protéines est plus constante et est généralement déterminée en déterminant la quantité d'azote dans les aliments. L'échantillon solide général est évalué à 0,2 - 2,0 g, l'échantillon semi - solide est évalué à 2 - 5 G, l'échantillon liquide est évalué à 10 - 20 ml. La faible teneur en azote de l'échantillon peut augmenter la quantité nominale.
III.2 La quantité d'acide sulfurique ajoutée, généralement 20 ml, mais lorsque la quantité d'échantillon dépasse 5 G, la quantité d'acide sulfurique doit être augmentée à raison de 5 ml par gramme d'échantillon. Sinon, la digestion de l'échantillon ne provoque pas de faibles résultats. 3. Ajout d'agent anti - mousse. Les aliments contenant plus de gras ou de sucre produisent beaucoup de mousse lors de la digestion, débordent à l'extérieur de la bouteille, provoquant une perte d'azote, de sorte qu'une petite quantité de zilj anti - mousse peut être ajoutée avant la digestion. Tels que: paraffine liquide, anti - mousse de silicium, etc.
IV.4 la quantité de catalyseur à ajouter doit être appropriée pour le sulfate de cuivre oui catalyseur, bon effet, prix bon marché, petite pollution de l'environnement, et est un indicateur lors de la distillation plus alcaline. Le sulfate de potassium peut accélérer la décomposition de la matière organique, de sorte que le point d'ébullition de l'acide sulfurique de 34,0 ℃ à plus de 40,0 ℃, mais la quantité ajoutée ne doit pas être trop grande, sinon une température trop élevée fera décomposer le sel d'ammonium et Wen - Hu Huimin provoque des pertes, En plus du sulfate de potassium, le sulfate de sodium a également le même effet. 5. Les échantillons difficiles à digérer peuvent également être correctement ajoutés avec une petite quantité de peroxyde d'hydrogène, l'hypochlorite de sodium et d'autres oxydants accélèrent l'oxydation de la matière organique.

V. II. Traitement de digestion des échantillons. 1. L'échantillon doit certainement être déplacé dans le flacon sec de Kaiser, sinon l'échantillon est facile à coller sur la paroi du flacon et n'est pas facile à digérer. La poudre attachée à la paroi du flacon doit être soigneusement lavée dans le flacon lors de l'ajout d'acide sulfurique pour permettre à l'échantillon d'être digéré dans son intégralité. Il y a aussi le soin de tourner le flacon de Kaiser pendant la digestion, en utilisant l'acide condensé pour précipiter les grains de carbone attachés à la paroi du flacon pour faciliter la digestion. 2. L'échantillon et le réactif ajoutés après agitation dans l'embouchure de la bouteille doit mettre un petit entonnoir, incliner la bouteille 45. Les coins sont inclinés à un filet d'amiante avec de petits trous, chauffés avec soin pour éviter les éclaboussures. À l'intérieur de la bouteille, l'échantillon est entièrement carbonisé, après l'arrêt de la mousse, puis renforcer la puissance de feu et maintenir le liquide à l'intérieur de la bouteille micro - ébullition, jusqu'à ce que le liquide est clair bleu - Vert clair après une demi - heure de chauffage, l'échantillon est digéré. Iii. Contrôle des conditions pendant la distillation.

Notes pour les expériences sur les protéines:

1, traitement des échantillons:

Échantillonnage, stockage et traitement des échantillons à normaliser, en évitant les cycles de gel - dégel. Empêcher la contamination de l'échantillon et maintenir la pureté de l'échantillon.

2, séparation et préparation des échantillons:

On utilise des méthodes de séparation appropriées telles que la SDS - page ou la chromatographie liquide. Gardez les instruments et les réactifs propres et évitez la contamination.

3, marquage et normalisation des échantillons:

Choisissez la bonne méthode de marquage des protéines qui garantit l'efficacité et la stabilité du marquage.

4, analyse de spectrométrie de masse:

S'assurer que l'étalonnage et les performances du spectromètre de masse et d'autres équipements connexes sont en place et que les conditions d'analyse de la spectrométrie de masse sont maintenues de manière uniforme

5. Traitement et analyse des données:

L'extraction des pics, l'étalonnage par spectrométrie de masse et la quantification des protéines doivent être effectués avec soin, en utilisant des outils professionnels. Analyser les données à l'aide de méthodes statistiques, en effectuant des corrections d'hypothèses multiples.

6, répétition technique et contrôle de qualité:

Effectuer des répétitions techniques, y compris les contrôles positifs et négatifs. Assurer la précision et la répétabilité des expériences.

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