104c1 (cellules de carcasse de cobaye transformées)

104c1 (cellules de carcasse de cobaye transformées)

Tous les produits de notre société sont destinés à des expériences scientifiques uniquement, ne font pas d'autres expériences scientifiques en dehors de leur utilisation!

Détails des marchandises:

Sources organisationnelles Embryons

Caractéristiques de croissance Cellules plaquées

Forme cellulaire Comme les fibroblastes

Niveau de biosécurité 1

Milieu de croissance RPMI-1640 + 10 % FBS + 1 % P/S

Proportion de générations recommandée 1: 3 - 1: 4

Fréquence de changement de liquide recommandée 2 ~ 3 fois / semaine

Conditions de congélation

Liquide de stockage congelé:55% milieu de base + 40% FBS + 5% DMSO

Température: azote liquide

Conditions de culture

Phase gazeuse: air,95%； CO2, 5 %

Température:37℃

Opérations de culture cellulaire:

1) réanimer les cellules:Le traitement de lyophilisation de culture cellulaire suivant est fourni à titre de référence uniquement, les étapes opérationnelles spécifiques sont dominées par les instructions du produit livré.

Le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire est décongelé en agitant rapidement dans un bain - Marie à 37°c, en ajoutant 4 ml de milieu de culture pour bien mélanger. Centrifuger 3 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 1 - 2 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite mises à incuber pendant une nuit dans des flacons de culture contenant la quantité appropriée de milieu (ou dans des boîtes de 6 cm, ajouter environ 4 ml de milieu et mettre à incuber pendant une nuit). Changez de liquide le troisième jour et vérifiez la densité cellulaire.

2) Passage cellulaire:Si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

a、 Jeter le surnageant de culture et rincer les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

b、 Ajouter 1 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,02% EDTA) dans le flacon de culture, laissez le digestat infiltrer toutes les cellules, placez le flacon de culture dans un incubateur à 37 ° C pour digérer pendant 1 - 3 min (selon la digestion des cellules), puis observez la digestion des cellules au microscope, Si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, retournez rapidement à la table d'opération, tapotez quelques fois sur le flacon de culture après avoir ajouté 2 - 3 ml de milieu pour terminer la digestion. Bien mélanger doucement et charger dans un tube à centrifuger stérile, centrifuger à 1000 RPM pendant 5 min, éliminer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler.

c、 La suspension cellulaire est divisée dans de nouvelles boîtes contenant 8 ml de milieu ou dans des flacons à raison de 1: 2 et placée dans un incubateur.

3) lyophilisation des cellules:La lyophilisation cellulaire peut être effectuée lorsque la croissance cellulaire est en bon état. La bouteille t25 ci - dessous à titre d'exemple;

a、 Recueillir les cellules et le liquide de culture cellulaire, charger dans un tube de centrifugation stérile, centrifuger à 1000 RPM pendant 4 min, jeter le surnageant, laver une fois avec du PBS, jeter le PBS et effectuer un comptage cellulaire.

b、 Ajouter le lyophilisat de cellules sans sérum selon le nombre de cellules, de sorte que la densité cellulaire 5 × 106 ~ 1 × 107 / ML, mélanger doucement, chaque lyophilisateur congeler 1 ml de suspension cellulaire, faites attention à la lyophilisation pour bien identifier.

c、 Placer le tube de congélation dans le réfrigérateur à - 80 ℃, après 24 heures, transférer à l'azote liquide pour le stockage par irrigation. Enregistrez la position de la lyophilisation pour la récupérer la prochaine fois.

Précautions pour la culture cellulairePour:

Un,Après avoir reçu les cellules, observez d'abord si le flacon de cellules est en bon état, si le liquide de culture a des fuites, de la turbidité et d'autres phénomènes, si l'un des phénomènes ci - dessus se produit, veuillez nous contacter à temps.

Deux,Lisez attentivement les instructions cellulaires pour connaître les informations relatives aux cellules, telles que la morphologie cellulaire, le milieu de culture utilisé, la proportion de sérum, les Cytokines requises, etc., pour vous assurer que les conditions de culture cellulaire sont cohérentes, si des problèmes surviennent avec les cellules en raison de conditions de culture incohérentes, la responsabilité incombe au client lui - même.

Trois,La surface du flacon cellulaire est essuyée avec de l'alcool à 75% et l'état des cellules est observé au microscope. En raison de problèmes de transport, certaines cellules en raison des changements de température et de l'éclatement violent de la formation de débris, est un phénomène normal. Après avoir observé le bon état cellulaire, la paroi du flacon stérilisé à 75% d'alcool a placé le flacon t25 dans un incubateur à 37 ° C pendant 2 à 4 heures.

Quatre,Les cellules adhérentes peuvent être digérées, les cellules en suspension sont directement mélangées pour collecter les cellules, centrifugées à 900 RPM - 1000 RPM pendant 3 min et abandonnées. Ajouter 5 ml de PBS cellules remises en suspension, centrifuger pendant 3 min à 900 RPM - 1000 RPM, remettre les cellules en suspension avec du milieu frais et ensemencer dans de nouveaux flacons ou boîtes de pétri, placer dans un incubateur pour la culture.

Cinq,Les clients sont invités à utiliser le milieu dans les mêmes conditions pour la culture cellulaire.

Six, Il est recommandé aux clients de prendre plusieurs photos de cellules dans chacun des 3 premiers jours après la réception des cellules, d'enregistrer l'état des cellules et de faciliter la communication avec notre département technique. En raison du transport, des conditions instables peuvent survenir dans les cellules sensibles individuelles, veuillez nous contacter à temps pour nous informer des spécificités des cellules afin que nos techniciens puissent suivre les visites de retour jusqu'à ce que le problème soit résolu.

VII,La cellule est à usage scientifique uniquement.

VIII,Remarque: le milieu utilisé pour le transport (milieu de perfusion) ne peut plus être utilisé pour la culture des cellules, veuillez remplacer le milieu fraîchement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructions pour la culture des cellules. Premier passage après réception des cellules Recommandation 1: 2 passage.

IX,Remarque: la génération 1: 2 correspond à 1 bouteille t25 pour 2 bouteilles t25 ou 2 boîtes de 6 cm. Pas 1 bouteille t25 passe 2 boîtes de 10cm.

Produits vendus par la société:

Facteur trilobé de rat3 (TFF3) kit de détection, nom anglais: TFF3 ELISA Kit

Kit ELISA Mouse signal ansduction Molecule (smad1) kit de détection de molécules de transduction du signal de souris (smad1)

Ratcalcitoningenerelatedpeptide, cgrpelisakit rat Calcitonine Gene - related peptide (CGRP) Test Kit 96T / 48T importé sous - ensemble

Cliakitforhabpelisakit protéine de liaison à l'acide hyaluronique de rat

Cystéase cellulaire- 7 (caspase - 7) kit de détection quantitative par fluorescence active 20 fois

Ratverylateappearingaigen, vlaelisakit kit de détection de l'antigène à éjection tardive (vla) chez le rat spécifications: 96T / 48T

Cystatine e recombinante de souris cst6 / protéine cst6 Protein

Inhibiteurs de la cystéine3 (cst3) Recombinant cystatine 3 (cst3)

Protéine humaine recombinante csnk2a2 / ck2a2 Protein

Protéine humaine recombinante csnk1g2 humaine

Protein Cynomolgus klrc1 protéine recombinante de singe Cynomolgus nkg2a / nkg2 / cd159a / klrc1 (étiquette FC)

Angiotensine II Receptor (Ang II 0,5 mg angiotensine II Receptor (Ang II) récepteur de l'angiotensine II (antigène)

Protéine humaine recombinante csnk1g2 humaine

Souris recombinantes fzd10 frizzled - 10 / protéine fzd10 (étiquette FC) (étiquette FC) Protein

Il20rb Protein rat protéine il20rb recombinante de rat (étiquette FC)

Protéine Tek recombinante humaine tie2 / cd202b / tek (étiquette his & GST) Protein

104C1 (Cellules de carcasse de cobaye transformées) etProtéines de gel de souris(gelsolin) Kit ELISA 96T / 48T

Kit de test ELISA Human blood coagulation factor XII (f XII) pour homme

Humanpro - gasin - releasingpeptide, progrpelisakit kit de détection du précurseur peptidique de libération de gastrine humaine (progrp) 96T / 48T

Human20 - hydroxyeicosateaenoicacid, kit de détection 12 - hete spécifications du kit de détection de l'acide 12 - hydroxyeicosanetétraénoïque humain (12 - hete): 96T / 48T

Le champignon/ kit de détection quantitative colorimétrique de l'activité de la cellobiase de levure 20 fois

Mouseapolipoproteinh, Apo helisakit souris Apolipoprotéine H (APO - h) Test Kit spécifications: 96T / 48T

Soluble chez la sourisKit de détection de sélectine E (se - selectin) Kit 96T / 48T assemblé / original

Soluble chez la sourisKit de détection endoglin (eng / scd105) Kit 96T / 48T assemblé / original

Enzyme granulaire de sourisB (gzms - b) kit de détection 96T / 48T Kit assemblé / original

Enzyme granulaire de sourisA (gzms - a) kit de détection 96T / 48T Kit assemblé / original