F81 (cellules rénales de chat)

F81 (cellules rénales de chat)

Propriétés des marchandises

Présentation des marchandises

Genre espèce Chats domestiques

Âge (sexe) Inconnu

Sources organisationnelles Inconnu

Caractéristiques de croissance Cellules plaquées

Forme cellulaire Cellules épithéliales comme

Niveau de biosécurité 1

Milieu de croissance RPMI-1640 + 10 % FBS + 1 % P/S

Proportion de générations recommandée 1: 2 - 1: 4

Fréquence de changement de liquide recommandée 2 ~ 3 fois / semaine

Conditions de congélation

Liquide de stockage congelé:55% milieu de base + 40% FBS + 5% DMSO

Température: azote liquide

Conditions de culture

Phase gazeuse: air,95%； CO2, 5 %

Température:37℃

Traitement cellulaire:

1) réanimation des cellules lyophilisées:

Le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire est décongelé sous agitation rapide dans un bain - Marie à 37°c, ajouté à un tube à centrifuger contenant 4 à 6 ml de milieu pour bien mélanger. Centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, éliminer le surnageant et remettre les cellules en suspension dans le milieu. La suspension cellulaire est ensuite ajoutée à des flacons (ou boîtes) contenant 6 - 8 ml de milieu pour incubation à 37°c pendant une nuit. La croissance cellulaire et la densité cellulaire sont observées au microscope le lendemain.

2) Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

Pour le passage de cellules adhérentes, on peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 0,25% (P / v) - 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL), placer dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger correctement le temps de digestion), puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après ajouter 3 - 4 ml de milieu contenant 10% de FBS pour terminer la digestion.

3. Bien mélanger doucement et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, jeter le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler. La suspension cellulaire est divisée dans de nouveaux flacons t25 dans un rapport de 1: 2, 6 - 8 ml de nouveau milieu configuré selon les instructions sont ajoutés pour maintenir la viabilité de croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 selon la réalité.

3) lyophilisation cellulaire: après réception des cellules, il est recommandé de lyophiliser un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

Culture de passage cellulaire Étapes opératoires:

(1) Le passage est effectué lorsque la morphologie cellulaire et la densité de croissance atteignent 90% au microscope.

(2) aspirer le liquide de culture. Ajouter du PBS pour nettoyer 1 ~ 2 fois, bien agiter et jeter.

(3) Ajouter une quantité couvrant le fond du flacon et contenant de l'EDTA.

(4) le flacon de culture est placé dans un incubateur à 37 ℃ pour la digestion, environ 3 minutes pour sortir, avec un microscope pour voir si les cellules ont plus de 80% de la quantité, se produit contraction devient ronde, l'espace intercellulaire devient plus grand. Tapotez doucement le flacon de culture pour faire tomber les cellules restantes, ajoutez 2 fois la quantité de digestion interrompue et soufflez uniformément pour éviter une digestion excessive.

(5) La suspension cellulaire est aspirée à l'intérieur du tube de centrifugation, 1000 RPM / min centrifuger 3 ~ 5 min.

(6) aspirer le déblaiement, ajouter le liquide de culture pour remettre les cellules en suspension, souffler les cellules pour les disperser uniformément.

(7) aspirer la suspension cellulaire de défaussement, choisir la densité appropriée pour ensemencer dans le nouveau flacon de culture, compléter le liquide de culture et bien agiter, placer un incubateur de CO2 à 37 ° C pour la culture.

(8) déterminer le temps d'échange ou de passage en fonction de l'état de croissance cellulaire.

(9) congélation des cellules

Produits vendus par la société:

Protéines tumorales de ratKit de détection p53 (tp53), nom anglais: tp53 ELISA Kit

Kit ELISA Mouse soluble Cell Differentiation Aigen 30 (scd30) kit de détection de l'antigène de différenciation leucocytaire soluble de souris 30 (scd30)

Mousee selectinelisakit de détection de souris e - selectin (E - selectin / cd62e) 96T / 48T Import

Cliakitforhumanig - likeanscriptsreceptor, récepteur transcrit de type iltsrelisakit

miniatureBase de données RNA Library (en construction) Adhésion

Elisakitadam8 métalloprotéase intégrine - like de rat 8

Protéine Protein de carboxypeptidase A2 / cpa2 humaine recombinante cpa2

Facteur de croissance endothéliale vasculaire d'origine glandulaire endocrinienne(EG-VEGF) 重组蛋白 Facteur de croissance endothéliale vasculaire dérivé de la glande endocrine recombinant (EG-VEGF)

Erbb4 Recombinant humain / rhésus her4 / erbb4 protéine Protein

Protéine humaine recombinante csnk1g1 / CKI - Gamma 1 humaine (étiquette his & GST)

Na Protein H1N1 neurase recombinante de la grippe A H1N1 (Neuraminidase / NA) (mutation n295s) (activité élevée)

Facteur de croissance endothéliale vasculaire d'origine glandulaire endocrinienne(EG-VEGF) 重组蛋白 Facteur de croissance endothéliale vasculaire dérivé de la glande endocrine recombinant (EG-VEGF)

Protéine humaine recombinante csnk1g1 / CKI - Gamma 1 humaine (étiquette his & GST)

Protéine Protein de carboxypeptidase A2 / cpa2 humaine recombinante cpa2

Na Protein H1N1 neurase recombinante de la grippe A H1N1 (Neuraminidase / NA) (mutation n295s) (activité élevée)

Erbb4 Recombinant humain / rhésus her4 / erbb4 protéine Protein

F81 (Cellules rénales de chat) etRécepteur de souris() Kit ELISA 96T / 48T

Kit ELISA Human coagulation factor XIII (f XIII) kit de détection humaine

Humananspoerassociatedwithaigenprocessing, tapelisakit kit de détection des transporteurs associés au traitement des antigènes humains (TAP) 96T / 48T Import

Kit de test human2,3 - dinohromboxaneb2,2,3 - Dinor - txb2 kit de test humain 2,3 - Dinor - Thromboxane B2 (2,3 - Dinor - txb2) Spécifications: 96T / 48T

Le champignon/ kit de dosage de l'activité oxydase d'échantillons de cellules de levure 20 fois

Mouseapoprotein, Apo - a1elisakit souris apolipoprotéine A1 (APO - A1) Test Kit spécifications: 96T / 48T

Antigène de différenciation leucocytaire soluble de souris86 (B7 - 2 / scd86) kit de détection 96T / 48T Kit assemblé / original

Antigène de différenciation leucocytaire soluble de souris40 Ligand (scd40l) kit de détection 96T / 48T Kit assemblé / original

Antigène de différenciation leucocytaire soluble de souris30 Ligand (scd30l) kit de détection 96T / 48T Kit assemblé / original

Antigène de différenciation leucocytaire soluble de souris30 (scd30) kit de détection 96T / 48T Kit assemblé / original

Traitement après réception cellulaire:

1) après avoir reçu les cellules, la paroi de la bouteille de désinfection de l'alcool à 75% place la bouteille t25 dans l'incubateur à 37 ℃ pendant environ 2 - 3H, si vous trouvez la bouteille de culture cassée, il y a un déversement de liquide et la contamination des cellules, s'il vous plaît contactez - nous rapidement après avoir pris des photos.

2) s'il vous plaît confirmer l'état des cellules sous un microscope 4 ou 5X, tout en prenant des photos des cellules fraîchement reçues (10 ×, 20 ×) 2 - 3 de chaque ainsi qu'une photo de l'apparence du flacon de culture à retenir comme base de l'état des cellules au moment de la réception Après - vente.

3) cellules collées: les cellules sont placées dans l'incubateur à 37 ℃ pendant 2 - 3H, sous le microscope pour observer la croissance des cellules et l'application de la condition, certaines cellules collées dans le processus d'expédition Express tomberont en raison de la vibration et de la condition de la masse après la chute. Si la densité de croissance des cellules observées sous miroir est inférieure à 60%, le milieu de perfusion peut être retiré du flacon de culture (s'il y a des cellules non collées qui doivent être récupérées par centrifugation, remises en suspension dans le flacon de culture d'origine), ajouter le milieu nouvellement formulé 6 - 8 ml, mettre dans l'incubateur de cellules pour poursuivre la culture. Si la densité de croissance cellulaire est supérieure à 70% - 80%, les cellules peuvent être traitées par passage. Pendant le passage, si les cellules tombées en raison des vibrations de transport doivent être récupérées par centrifugation.