Rk - 13 (lignée de cellules rénales de lapin)

Traitement cellulaire:

1) réanimation des cellules lyophilisées:

Le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire est décongelé sous agitation rapide dans un bain - Marie à 37°c, ajouté à un tube à centrifuger contenant 4 à 6 ml de milieu pour bien mélanger. Centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, éliminer le surnageant et remettre les cellules en suspension dans le milieu. La suspension cellulaire est ensuite ajoutée à des flacons (ou boîtes) contenant 6 - 8 ml de milieu pour incubation à 37°c pendant une nuit. La croissance cellulaire et la densité cellulaire sont observées au microscope le lendemain.

2) Passage cellulaire: si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.

Pour le passage de cellules adhérentes, on peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 0,25% (P / v) - 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL), placer dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger correctement le temps de digestion), puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après ajouter 3 - 4 ml de milieu contenant 10% de FBS pour terminer la digestion.

3. Bien mélanger doucement et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, jeter le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler. La suspension cellulaire est divisée dans de nouveaux flacons t25 dans un rapport de 1: 2, 6 - 8 ml de nouveau milieu configuré selon les instructions sont ajoutés pour maintenir la viabilité de croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 selon la réalité.

3) lyophilisation cellulaire: après réception des cellules, il est recommandé de lyophiliser un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

Rk - 13 (lignée de cellules rénales de lapin)

Propriétés des marchandises

Présentation des marchandises

Âge (sexe) 5 semaines d'âge

Sources organisationnelles Les reins

Caractéristiques de croissance Cellules plaquées

Forme cellulaire Cellules épithéliales comme

Niveau de biosécurité 2

Milieu de croissance MEM + 10% FBS + 1% P / S

Proportion de générations recommandée 1: 2 - 1: 4

Fréquence de changement de liquide recommandée 2 ~ 3 fois / semaine

Conditions de congélation

Liquide de stockage congelé:55% milieu de base + 40% FBS + 5% DMSO

Température: azote liquide

Conditions de culture

Phase gazeuse: air,95%； CO2, 5 %

Température:37℃

Culture de passage cellulaire Étapes opératoires:

(1) Le passage est effectué lorsque la morphologie cellulaire et la densité de croissance atteignent 90% au microscope.

(2) aspirer le liquide de culture. Ajouter du PBS pour nettoyer 1 ~ 2 fois, bien agiter et jeter.

(3) Ajouter une quantité couvrant le fond du flacon et contenant de l'EDTA.

(4) le flacon de culture est placé dans un incubateur à 37 ℃ pour la digestion, environ 3 minutes pour sortir, avec un microscope pour voir si les cellules ont plus de 80% de la quantité, se produit contraction devient ronde, l'espace intercellulaire devient plus grand. Tapotez doucement le flacon de culture pour faire tomber les cellules restantes, ajoutez 2 fois la quantité de digestion interrompue et soufflez uniformément pour éviter une digestion excessive.

(5) La suspension cellulaire est aspirée à l'intérieur du tube de centrifugation, 1000 RPM / min centrifuger 3 ~ 5 min.

(6) aspirer le déblaiement, ajouter le liquide de culture pour remettre les cellules en suspension, souffler les cellules pour les disperser uniformément.

(7) aspirer la suspension cellulaire de défaussement, choisir la densité appropriée pour ensemencer dans le nouveau flacon de culture, compléter le liquide de culture et bien agiter, placer un incubateur de CO2 à 37 ° C pour la culture.

(8) déterminer le temps d'échange ou de passage en fonction de l'état de croissance cellulaire.

(9) congélation des cellules

Traitement après réception cellulaire:

1) après avoir reçu les cellules, la paroi de la bouteille de désinfection de l'alcool à 75% place la bouteille t25 dans l'incubateur à 37 ℃ pendant environ 2 - 3H, si vous trouvez la bouteille de culture cassée, il y a un déversement de liquide et la contamination des cellules, s'il vous plaît contactez - nous rapidement après avoir pris des photos.

2) s'il vous plaît confirmer l'état des cellules sous un microscope 4 ou 5X, tout en prenant des photos des cellules fraîchement reçues (10 ×, 20 ×) 2 - 3 de chaque ainsi qu'une photo de l'apparence du flacon de culture à retenir comme base de l'état des cellules au moment de la réception Après - vente.

3) cellules collées: les cellules sont placées dans l'incubateur à 37 ℃ pendant 2 - 3H, sous le microscope pour observer la croissance des cellules et l'application de la condition, certaines cellules collées dans le processus d'expédition Express tomberont en raison de la vibration et de la condition de la masse après la chute. Si la densité de croissance des cellules observées sous miroir est inférieure à 60%, le milieu de perfusion peut être retiré du flacon de culture (s'il y a des cellules non collées qui doivent être récupérées par centrifugation, remises en suspension dans le flacon de culture d'origine), ajouter le milieu nouvellement formulé 6 - 8 ml, mettre dans l'incubateur de cellules pour poursuivre la culture. Si la densité de croissance cellulaire est supérieure à 70% - 80%, les cellules peuvent être traitées par passage. Pendant le passage, si les cellules tombées en raison des vibrations de transport doivent être récupérées par centrifugation.

Produits vendus par la société:

Facteur trilobé de rat2 (tff2) Test Kit, nom anglais: tff2 ELISA Kit

Mouse signal ansduction Molecule 7 (smad7) ELISA Kit kit de détection de la molécule de transduction du signal de souris 7 (smad7)

Ratcarbonicanhydrase, caelisakit trousse de détection d'enzymes de rat (CA) 96T / 48T importée

Cliakitforhaase (humanhyaluronidase) ELISAkit Hyaluronidase humaine

Cystéase cellulaire- 8 (caspase - 8) kit de détection quantitative par colorimétrie active 20 fois

Ratvascuolarcelladhesionmolecule1, vcam - 1elisakit rat vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (vcam - 1 / cd106) Test Kit spécifications: 96T / 48T

Souris recombinantes fzd10 frizzled - 10 / protéine fzd10 (étiquette FC) (étiquette FC) Protein

Angiotensine II Receptor (Ang II 0,5 mg angiotensine II Receptor (Ang II) récepteur de l'angiotensine II (antigène)

Protéine Tek recombinante humaine tie2 / cd202b / tek (étiquette his & GST) Protein

Protéine humaine recombinante csnk1g2 humaine

Il20rb Protein rat protéine il20rb recombinante de rat (étiquette FC)

Inhibiteurs de la cystéine3 (cst3) Recombinant cystatine 3 (cst3)

Protéine humaine recombinante csnk1g2 humaine

Cystatine e recombinante de souris cst6 / protéine cst6 Protein

Protein Cynomolgus klrc1 protéine recombinante de singe Cynomolgus nkg2a / nkg2 / cd159a / klrc1 (étiquette FC)

Protéine humaine recombinante csnk2a2 / ck2a2 Protein

RK-13 (Lignée de cellules rénales de lapin) etAnti - complexe de souris(TAT) Kit ELISA 96T / 48T

Rat parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit kit de détection de l'hormone parathyroïdienne (PTH) chez le rat

Humanglucoseanspoer1, gl1elisakit kit de détection du transporteur de glucose humain 1 (gl1) 96T / 48T importé

Human2,3 - disphosphoglycerate, 2,3 - DPG Test Kit pour l'acide 2,3 - di0 - glycérique humain (2,3 - DPG) spécifications du kit: 96T / 48T

Le champignon/ kit d'isolement total d'ARN de cellules de levure 20 fois

Mouseapoproteinb100, Apo - b100elisakit souris apolipoprotéine B100 (APO - B100) Test Kit spécifications: 96T / 48T

Soluble chez la sourisP - sélectine (mousse SP - sélectine / scd62p) Action: Elisa spécifications: sous - ensemble importé

SourisSubstance P (mousse Substance p) Action: Elisa spécifications: sous - ensemble importé

Prolactine pour souris(mousse PRL) rôle: Elisa spécifications: sous - ensemble importé

Grossesse chez la souris(mousse prog) rôle: Elisa spécifications: sous - ensemble importé