Cellules épithéliales cervicales de rat

Introduction aux cellules:

Cou situé dans la partie inférieure, cône approximatif, long 2.5à3 cmL'extrémité supérieure est reliée au corps et l'extrémité inférieure est profonde. La taille du col de l'utérus et le rapport palatial varient en fonction de l'âge et de l'état.

La paroi cervicale est composée de la muqueuse, du myomètre et de la membrane externe. Parmi eux, la couche muqueuse est principalement constituée de cellules épithéliales muqueuses.

Caractéristiques des cellulesPour:

1) et Les cellules proviennent des tissus normaux des animaux de laboratoire.

2)Identification des cellules:PCKLa coloration fluorescente est positive.

3)Pureté cellulaire identifiée supérieure à90%- Oui.

4)Ne contient pasVIH-1Et, HBVEt,VHC, mycoplasmes, levures et.

5)Mode de croissance cellulaire: pavé - like, cellules polygonales, culture murale.

Milieu de culture recommandé:

Nous recommandons d'utiliserDelfLa génération originale épithélium Système de culture cellulaire Comme réactif de culture pour cette cellule.

Rapport expérimental:

I. séparation et culture:

1, dans des conditions stériles, retirer le tissu auriculaire de rat SD d'âge 1 - 3D, puis laver ce bloc de tissu avec du PBS 2 fois, couper le tissu à environ 1 mm3 taille;

Ajouter 4 ml de digestat enzymatique (0,1% et 0,1% collagénase de type I) dans le bloc de tissu, suspendre pendant 10 s, mettre à 37 ℃ pour la digestion pendant 10 min, après quoi souffler avec un compte - gouttes pour faire une suspension unicellulaire, précipiter naturellement et recueillir le surnageant, mettre 4 ℃ après la fin de la digestion avec un milieu contenant 10% de FBS;

3, le tissu restant est ajouté 3 ~ 4 ml de digestat enzymatique, suspendu pendant 10 s, après la digestion à 37 ℃ pendant 10 min, selon la méthode ci - dessus pour recueillir le surnageant et terminer la digestion après 4 ℃ placer, répétez cette étape 2 - 3 fois jusqu'à ce que le tissu soit digéré;

4, filtrer le digestat cellulaire avec un tamis en acier inoxydable de 200 Mesh, centrifuger à 1200r / min pendant 10 min, éliminer le surnageant, les cellules précipitées sont suspendues avec du milieu contenant 10% de FBS dmem / F12, ensemencées dans des flacons de culture de 25 cm 2, placés à 37 ° C, incubés Dans un incubateur à 5% de CO2;

5, après l'application différentielle de la paroi 1H, le milieu de culture est aspiré et la culture continue comme l'expérience nécessite l'ensemencement dans une plaque de 6 puits;II. Identification par immunofluorescence:

1, à la croissance des myocytes auriculaires à 80% de fusion, le milieu de culture est abandonné et les cellules sont rincées 2 fois avec du PBS incubé pendant 10 min, puis les cellules sont fixées avec du paraformaldéhyde à 4% pendant 15 min à température ambiante;

2, PBS rincer les cellules 2 fois pendant 10 min, puis à 4 ° c Avec 0,1% Triton X - 100 perméable pendant 15 min;

3, PBS rincer les cellules 2 fois, chaque fois pendant 10 min, puis dans des conditions de température ambiante, fermer les cellules avec BSA 4% pendant 30 min;

4, diluer alpha - Actin un anti dans un rapport de 1: 100, puis placez - le dans un réfrigérateur à 4 ° C pour incuber les cellules pendant la nuit;

5, PBS rincer les cellules 3 fois, chaque fois pendant 10 min, diluer le bis - anti - alpha - actine dans un rapport de 1: 150, 37 ℃ condition de laisser 1 h;

6, rincer 3 fois avec du PBS, chaque fois pendant 10 min, observer l'image sous un microscope à fluorescence inversé et prendre des photos.

Produits vendus par la société:

Protéine de cadre de tête de fourche de ratP3 (FoxP3)Kit de détection, nom anglais:Kit ELISA FoxP3

Kit ELISA de la phénylalanine ammoniac lyase (PAL) de souris LSourisLBenzylaminase(PAL)Kits de détection

ELISAGranulocytes de souris-Facteur de stimulation des colonies de macrophages(souris GM-CSF) Sous - assemblage importé

Précurseur de la cliakildh (Lactase humaine)Lactate déshydrogénase humaine

Type universelN-Acétyltransférase(NAT)Chromatographie liquide haute performance active(HPLC)Kit de détection quantitative20Une fois

Elisakiven -Gamma interféron Gamma singe

CDH13Rat reconstituéCDH13 / Cadhérine-13 / H CadhérineLes protéinesprotéines

DAD1 (récepteur de dopamine D1)Récepteurs de dopamineLe D1Antigènes

IL16Personnes reconstituéesIL16 / Interleucine-16Les protéinesprotéines

protéine ENTPD3 humainPersonnes reconstituéesENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3Les protéines

Souris protéine CSouris recombinantesC / SLAMF2 / BCM1Les protéines

DAD1 (récepteur de dopamine D1)Récepteurs de dopamineLe D1Antigènes

protéine ENTPD3 humainPersonnes reconstituéesENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3Les protéines

CDH13Rat reconstituéCDH13 / Cadhérine-13 / H CadhérineLes protéinesprotéines

Souris protéine CSouris recombinantesC / SLAMF2 / BCM1Les protéines

IL16Personnes reconstituéesIL16 / Interleucine-16Les protéinesprotéines

Foetoglobuline de souris a/Alpha - foetoprotéine(AFP)ELISAKits de réactifs96T / 48T

Activateur de récepteur soluble au rat du ligand du facteur nucléaire kappa B (sRANKL)Facteur nucléaire soluble κ chez le ratC. BLigands du facteur d'activation du récepteur(sRANKL)Kits de détection

Gen d'activation de combinaison huma1, RAG-1ELISAKitGène activateur Recombinant humain1(RAG-1)Kits de détection96T / 48TSous - assemblage importé

Corps cellulaire pariétal de gaz humain, AGPA/PCAKit de détection Human anti - sclérotéine anticorps(ara)Spécifications du kit de détection:96T / 48T

Les plantes lai(lysine)Kit de détection quantitative par colorimétrie chimique du contenu20Une fois

HumanVitamine B6,VB6ELISAKitpersonneB6(VB6)Spécifications du kit de détection:96T / 48T

Cellules épithéliales cervicales de ratComposants du complément de souris5 Nom anglais: Complexe de souris Compone 5 Spécifications: Abréviations en anglais: C5

Facteur de croissance du tissu conjonctif chez la souris Nom anglais: Facteur de croissance du tissu conjonctif de souris Spécifications: Abréviations en anglais: CTGF

Cortex de souris Nom anglais: Souris Coicosterone Spécifications: Abréviations en anglais: CO

Créatinine chez la souris Nom anglais: Créatinine souris Spécifications: Abréviations en anglais: CT

Précautions:

1. Après avoir reçu les cellules, observez d'abord si la bouteille de cellules est en bon état, si le liquide de culture a des fuites, des troubles et d'autres phénomènes, si l'un des phénomènes ci - dessus se produit, veuillez nous contacter à temps.

2. Lisez attentivement les instructions de la cellule pour comprendre les informations relatives aux cellules, telles que la morphologie cellulaire, le milieu de culture utilisé, la proportion de sérum, les Cytokines requises, etc., pour vous assurer que les conditions de culture cellulaire sont cohérentes, si des problèmes surviennent avec les cellules en raison de conditions de Culture incohérentes, la responsabilité incombe au client lui - même.

3. Essuyez la surface du flacon cellulaire avec de l'alcool à 75% et observez l'état des cellules au microscope. En raison de problèmes de transport, certaines cellules en raison des changements de température et de l'éclatement violent de la formation de débris, est un phénomène normal. Après avoir observé le bon état cellulaire, la paroi du flacon de désinfection à 75% d'alcool a placé le flacon t25 dans un incubateur à 37 ° C pendant 4 à 6 heures.

4. Les cellules adhérentes peuvent être digérées, les cellules en suspension mélangent directement les cellules de collecte, 900 RPM - 1000 RPM centrifuger pendant 3 minutes, abandonner le surnageant. Ajouter 5 ml de PBS cellules resuspendues, centrifuger à nouveau 900 RPM - 1000 RPM pendant 3 min, resuspendre les cellules avec du milieu frais * et ensemencer dans de nouveaux flacons ou boîtes de pétri, placer dans un incubateur pour la culture.

5. Demandez au client d'utiliser le milieu de culture dans les mêmes conditions pour la culture cellulaire.

6. Il est recommandé aux clients de prendre plusieurs photos de cellules chacun pendant les 3 premiers jours après la réception des cellules, d'enregistrer l'état des cellules, de faciliter la communication et la communication avec notre département technique. En raison du transport, des conditions instables peuvent survenir dans les cellules sensibles individuelles, veuillez nous contacter à temps pour nous informer des spécificités des cellules afin que nos techniciens puissent suivre les visites de retour jusqu'à ce que le problème soit résolu.

7. La cellule est pour l'usage scientifique seulement.

8.remarque: le milieu de culture utilisé pour le transport (milieu de culture de perfusion) ne peut plus être utilisé pour cultiver les cellules, veuillez remplacer le milieu * nouvellement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructions pour cultiver les cellules. Réception de la recommandation post - passage cellulaire 1: 2 passage.

Note: la génération 1: 2 correspond à 1 bouteille t25 pour 2 bouteilles t25 ou 2 boîtes de 6 cm. Pas 1 bouteille t25 passe 2 boîtes de 10cm.