Cellules souches périostiques de rat

Introduction aux cellules:

Le périoste est une couche de tissu conjonctif qui recouvre la surface de l'os. Le périoste est ancré à l'os par des fibres de type shapee, agissant comme un pont reliant le tissu musculaire externe à l'os interne, une structure qui aide à maintenir l'intégrité du périoste.

Le périoste se compose de deux parties, une couche externe de fibres lâches et une couche interne de cellules denses, qui contient des fibroblastes, des fibres de collagène, des fibres élastiques et des microtubules. La couche cellulaire est principalement constituée de cellules souches d'origine périostique qui, comme les cellules souches mésenchymateuses d'origine médullaire, ont un potentiel de différenciation multidirectionnelle.

La réparation osseuse, le remodelage et le renouvellement sont étroitement liés aux cellules souches de la membrane osseuse. Dans des conditions physiologiques normales, le tissu périostique joue un rôle dans le maintien du renouvellement et du remodelage osseux, où les cellules souches peuvent être différenciées en ostéoblastes par ostéogenèse intramembranaire et en Chondrocytes par ostéogenèse intracartilagineuse.

Caractéristiques des cellulesPour:

1) et Les cellules proviennent du tissu périostique articulaire normal des animaux de laboratoire.

2)Identification des cellules:CD90ouCD73La coloration fluorescente est positive.

3)Pureté cellulaire identifiée supérieure à90%- Oui.

4)Ne contient pasVIH-1Et, HBVEt,VHC, mycoplasmes, levures et.

5)Mode de croissance cellulaire: cellules fibroblastiques, culture murale.

Milieu de culture recommandé:

Nous recommandons d'utiliserDelfLa génération originale épithélium Système de culture cellulaire Comme réactif de culture pour cette cellule.

Rapport expérimental:

I. séparation et culture:

1, dans des conditions stériles, retirer le tissu auriculaire de rat SD d'âge 1 - 3D, puis laver ce bloc de tissu avec du PBS 2 fois, couper le tissu à environ 1 mm3 taille;

Ajouter 4 ml de digestat enzymatique (0,1% et 0,1% collagénase de type I) dans le bloc de tissu, suspendre pendant 10 s, mettre à 37 ℃ pour la digestion pendant 10 min, après quoi souffler avec un compte - gouttes pour faire une suspension unicellulaire, précipiter naturellement et recueillir le surnageant, mettre 4 ℃ après la fin de la digestion avec un milieu contenant 10% de FBS;

3, le tissu restant est ajouté 3 ~ 4 ml de digestat enzymatique, suspendu pendant 10 s, après la digestion à 37 ℃ pendant 10 min, selon la méthode ci - dessus pour recueillir le surnageant et terminer la digestion après 4 ℃ placer, répétez cette étape 2 - 3 fois jusqu'à ce que le tissu soit digéré;

4, filtrer le digestat cellulaire avec un tamis en acier inoxydable de 200 Mesh, centrifuger à 1200r / min pendant 10 min, éliminer le surnageant, les cellules précipitées sont suspendues avec du milieu contenant 10% de FBS dmem / F12, ensemencées dans des flacons de culture de 25 cm 2, placés à 37 ° C, incubés Dans un incubateur à 5% de CO2;

5, après l'application différentielle de la paroi 1H, le milieu de culture est aspiré et la culture continue comme l'expérience nécessite l'ensemencement dans une plaque de 6 puits;II. Identification par immunofluorescence:

1, à la croissance des myocytes auriculaires à 80% de fusion, le milieu de culture est abandonné et les cellules sont rincées 2 fois avec du PBS incubé pendant 10 min, puis les cellules sont fixées avec du paraformaldéhyde à 4% pendant 15 min à température ambiante;

2, PBS rincer les cellules 2 fois pendant 10 min, puis à 4 ° c Avec 0,1% Triton X - 100 perméable pendant 15 min;

3, PBS rincer les cellules 2 fois, chaque fois pendant 10 min, puis dans des conditions de température ambiante, fermer les cellules avec BSA 4% pendant 30 min;

4, diluer alpha - Actin un anti dans un rapport de 1: 100, puis placez - le dans un réfrigérateur à 4 ° C pour incuber les cellules pendant la nuit;

5, PBS rincer les cellules 3 fois, chaque fois pendant 10 min, diluer le bis - anti - alpha - actine dans un rapport de 1: 150, 37 ℃ condition de laisser 1 h;

6, rincer 3 fois avec du PBS, chaque fois pendant 10 min, observer l'image sous un microscope à fluorescence inversé et prendre des photos.

Produits vendus par la société:

Héparine de rat(HS)Kit de détection, nom anglais:Kit ELISA HS

Kit d'ELISA pour cellules d'îlots de souris (ICA)Anticorps de cellules d'îlot pancréatique de souris(ICA)Kits de détection

protéine de choc thermique 60,hSP-60ELISAKitProtéines de choc thermique de rat60 (Hsp-60)Kits de détection96T / 48TSous - assemblage importé

Regarde, voyons voir.Facteur de stimulation des colonies de granulocytes de rat

Oxaloacétate aminotransférase de vallée cellulaire(GOT)Kit de détection quantitative par spectrométrie active20Une fois

Protéine liante au raétinol, RBPELISAKitProtéines de liaison de rat(RBP)Spécifications du kit de détection:96T / 48T

FCGR2ASinge Cynomolgus reconstituéCD32a / FCGR2ALes protéinesprotéines

MrpL28 (protéine ribosomale mitochondriale L28) 0,5mgMrpL28 (protéine ribosomale mitochondriale L28)Protéines ribosomales mitochondrialesL28(Antigènes) et

BLMHPersonnes reconstituéesHydrolase BLMH / BLMLes protéinesprotéines

protéine EPDR1 humainPersonnes reconstituéesEPDR1Les protéines

Souris protéine TFSouris recombinantesTransferrine / CD176 / SérotransferrineLes protéines(Fc)étiquette) et

MrpL28 (protéine ribosomale mitochondriale L28) 0,5mgMrpL28 (protéine ribosomale mitochondriale L28)Protéines ribosomales mitochondrialesL28(Antigènes) et

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FCGR2ASinge Cynomolgus reconstituéCD32a / FCGR2ALes protéinesprotéines

Souris protéine TFSouris recombinantesTransferrine / CD176 / SérotransferrineLes protéines(Fc)étiquette) et

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Facteurs dérivés des cellules stromales de souris1bêta(SDF-1)bêta/ cxcl12) test d'immunoadsorption enzymatiqueKits de réactifs96T / 48T

Kit ELISA pour Salmonella typhi aigen (St-Ag)Antigène de la fièvre typhoïde humaine(St-Ag)Kits de détection

Nous allons faire faillite jusqu'au 1er janvierProtéine de membrane latente humaine1(LMP-1)Kits de détection96T / 48TSous - assemblage importé

Corps humain-glycoprotéine, GPKit de détection anticorps anti - glycoprotéines humaines(GP)Spécifications du kit de détection:96T / 48T

Plantes lumineuses(leucine)Kit de détection quantitative par colorimétrie de contenu20Une fois

HumanvisfatineELISAKitLipides internes humains/Graisses viscérales(visfatine)Spécifications du kit de détection:96T / 48T

Cellules souches périostiques de ratDéshydrogénase de sourisE1 (pdhe1) illizanite Elisa. 96T / 48T

Glycogène Synthase Kinase de souris(GSK) elisay Elisa. 96T / 48T

SourisChimiokinesLigand de Chimiokine16 (cxcl 16) Élite Elisa. 96T / 48T

Acide adénogène hautement sensible chez la souris(u-T3)ELISAKit Elisa. 96T / 48T

Précautions:

1. Après avoir reçu les cellules, observez d'abord si la bouteille de cellules est en bon état, si le liquide de culture a des fuites, des troubles et d'autres phénomènes, si l'un des phénomènes ci - dessus se produit, veuillez nous contacter à temps.

2. Lisez attentivement les instructions de la cellule pour comprendre les informations relatives aux cellules, telles que la morphologie cellulaire, le milieu de culture utilisé, la proportion de sérum, les Cytokines requises, etc., pour vous assurer que les conditions de culture cellulaire sont cohérentes, si des problèmes surviennent avec les cellules en raison de conditions de Culture incohérentes, la responsabilité incombe au client lui - même.

3. Essuyez la surface du flacon cellulaire avec de l'alcool à 75% et observez l'état des cellules au microscope. En raison de problèmes de transport, certaines cellules en raison des changements de température et de l'éclatement violent de la formation de débris, est un phénomène normal. Après avoir observé le bon état cellulaire, la paroi du flacon de désinfection à 75% d'alcool a placé le flacon t25 dans un incubateur à 37 ° C pendant 4 à 6 heures.

4. Les cellules adhérentes peuvent être digérées, les cellules en suspension mélangent directement les cellules de collecte, 900 RPM - 1000 RPM centrifuger pendant 3 minutes, abandonner le surnageant. Ajouter 5 ml de PBS cellules resuspendues, centrifuger à nouveau 900 RPM - 1000 RPM pendant 3 min, resuspendre les cellules avec du milieu frais * et ensemencer dans de nouveaux flacons ou boîtes de pétri, placer dans un incubateur pour la culture.

5. Demandez au client d'utiliser le milieu de culture dans les mêmes conditions pour la culture cellulaire.

6. Il est recommandé aux clients de prendre plusieurs photos de cellules chacun pendant les 3 premiers jours après la réception des cellules, d'enregistrer l'état des cellules, de faciliter la communication et la communication avec notre département technique. En raison du transport, des conditions instables peuvent survenir dans les cellules sensibles individuelles, veuillez nous contacter à temps pour nous informer des spécificités des cellules afin que nos techniciens puissent suivre les visites de retour jusqu'à ce que le problème soit résolu.

7. La cellule est pour l'usage scientifique seulement.

8.remarque: le milieu de culture utilisé pour le transport (milieu de culture de perfusion) ne peut plus être utilisé pour cultiver les cellules, veuillez remplacer le milieu * nouvellement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructions pour cultiver les cellules. Réception de la recommandation post - passage cellulaire 1: 2 passage.

Note: la génération 1: 2 correspond à 1 bouteille t25 pour 2 bouteilles t25 ou 2 boîtes de 6 cm. Pas 1 bouteille t25 passe 2 boîtes de 10cm.