Services expérimentaux pour les systèmes crispr / cas12a

Un,Services expérimentaux pour les systèmes crispr / cas12aDéfinition des systèmes et origines biologiques

CRISPR/Cas12a(anciennement appeléCpf1) appartenant àClasse 2 Type V système crisprEst un mécanisme immunitaire adaptatif des bactéries et des archées pour identifier et couper l'ADN viral ou plasmidique envahissant. Par rapport à cas9, son mode de fonctionnement lui confère des avantages significatifs dans l'édition de gènes, la détection moléculaire et la régulation multigénique.

Deux,Services expérimentaux pour les systèmes crispr / cas12aMécanismes moléculaires de base et caractéristiques techniques

(i) processus d'action

Comparaison des caractéristiques clés (cas12a vs cas9)

NotePour:

• VReprésente A / C / G (non t), comme 5 '- ttta / TTTC / tttg - 3'.

• 黏性末端Il est plus facile de déclencher la réparation de recombinaison homologue (HDR) pour améliorer l'efficacité de l'édition de précision.

Iii. Avantages et scénarios d'application

(i) Avantages techniques

1. Efficacité de l'édition multigéniquePour:

• Un seul réseau de crrna peut cibler plusieurs gènes simultanément sans avoir à construire des tracrrna à plusieurs reprises et convient à la régulation de voies complexes.

2. Adaptation génomique enrichie atPour:

• L'efficacité de l'édition des génomes riches en at (p. ex., plantes, parasites) est significativement plus élevée que celle de cas9.

3. Faible risque de déracinementPour:

• Dépend strictement de l'activation de PAM, et l'activité de trans - clivage peut être désactivée, avec un taux de désactivation du génome entier inférieur à celui de cas9.

4. Facilité de livraisonPour:

• Les protéines sont plus petites et plus faciles à emballer dans des vecteurs viraux tels que AAV, ce qui convient à la thérapie génique in vivo.

Ii) Principaux domaines d'application